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mRNA為單股，一般會卷繞成特定的三級結構，并與某些蛋白質結合，而以messengerribonucleoproteinparticles（mRNPs）的型式存在于細胞內；自細胞抽取RNA時，一般會以...
1簡介DEAE-纖維素，它采用平均粒徑為50µm的顆粒型親水高分子聚合物，表面又用大分子糖鏈接枝，使它有更高的比表面積和更好的生物兼容性，它在高流水下保持更高載量，同時又具有更好的分辨率。...
方法步驟：1）經BamHI及HindIII作用的pBlueGus及pQE31，置65℃水浴10min，移至冰浴降溫后，以含EtBr的1.0%agarosegel進行電泳。2）NA45以滅過菌的剪刀剪成...
方法步驟：1）經BamHI及HindIII作用的pBlueGus及pQE31，置于65℃水浴10min，移至冰浴降溫后，以含EtBr的1.0%agarosegel進行電泳（兩種樣品各用六個wells，...
方法步驟：1）前一天進行轉形的培養皿，當菌落長至約0.5mm大小時，將培養皿移至4℃放置至少1h。2）準備一張無菌的硝化纖維濾膜，以鉛筆在邊緣標上組別。◆請戴手套后再拿取濾膜！3）打開培養皿蓋子，以兩...
方法步驟：◆注意！進行這一部份實驗的前，請先確定pBlueGus/HindIII與pBlueGus/BamHI兩者的酵解反應都已經*。1）于酵解反應#1與#2的微量離心管分別加入182μL去離子水。2...
[方法]1．配制1個50ul連接混合液，包含：●10×連接緩沖液，5uI●水，16ul●NcoI和NotI消化的pHENl（100g／ul），20ul●VcoI和NotI消化的scFv文庫（100g/...
[方法]1．設計并合成含有CDR3隨機化序列的VHFOR引物。當然必須以擬進行親和力成熟的抗體VH基因作為設計的基礎。本例中，VHCDR3的7個氨基酸被隨機化。在每個隨機化位點中，保留了大約50％野生...
[方法]1．配制50ulPCR反應混合液，包含：●水，34．5ul●20XdNTP（每種5mmol／L），2，5ul●10XVent聚合酶緩沖液，5．0ul●LMB3引物（10pmol/u1），2．5...
在基于結合動力學，也被稱為解離速率（κoff）]的選擇中，在將遠遠過量的非標記抗原加入到混合液中并維持一段特定時間之前，將首先選用飽和量的標記抗原使其與噬菌體群結果。通過確定與末標記抗原競爭的持續的時...
（1）蛋白酶消化蛋白酶消化可以去除覆蓋于抗原決定簇表面的雜蛋白，更為重要的是因甲醛固定而引起的交聯被打開，有利于抗原—抗體的結合，提高陽性檢測率。（2）抗原修復選擇適宜的修復液（pH值、離子濃度）、修...
①膠體金溶液可以重復制備，其顆粒大小可以控制，可較容易進行免疫電鏡的雙重或多重標記；②金標探針有很高的電子密度，有特殊的分辨率，定位準確；③金標探針能發射二次電子和反射電子，是掃描電鏡目前的標記物；④...
膠體金可用多種方法制備，其中應用較為廣泛的是化學還原法。這一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的還原劑，使金離子還原為金原子，可用于制備膠體金的還原劑有50余種，但在生物醫學領域內zui為常用...
乙醇—超聲波還原法（Baigent和Muller，1980）（1）取1％AuCl3·HCl水溶液lml加入100ml雙重蒸餾水。（2）用0．2m01/LK2C03調pH至7．2，再加入lml無水乙醇。...
[方法]1．建立以下連接反應：●載體DNA（pG6AppG6B，pG6C）（10ug）xul●cDNA片段（3～5ug）yul●10×連接緩沖液40ul●T4DNA連接酶（6WeissU/ul）5ul...
[方法]1．加2～3ul純化的連接反應物（zui大值為0.3ugDNA）到80ul的*0F’電轉化感受態細胞中，輕輕搖晃混合。使用30ng（2ul）的pUCl9控制電轉化效率。2．將細胞+DNA懸浮液...
[方法]1．在0．5ml微量離心管中配制50ulPCR反應混合液，包括：●Millipore水，31.5ul●10×VentDNA聚合酶緩沖液，5．0ul●20×dNTP，2．5ul●正向引物，2．0...
[方法]1．在0．5ml微量離心管內配制以下PCR反應混合液。配制成2個“反應管”，1個含有V。文庫DNA，另1個則含有Vl文庫DNA。反應管對照1對照2●scFV接頭DNA（100ng/ul）1．0...
[方法]1．在0．5ml微量離心管中，配制兩個50/z1PCR反應混合液（1個用于VH—VκscFv文庫，另1個用于Vu—VλscFv文庫），其中含有：●水，36．5//1●10XTag緩沖液，5．0...
[方法]1，配制兩個100ulPCR反應混合液來消化scFV文庫，其中1個用于VH-VκscFv文庫，另1個用于VH-VλscFv文庫，該混合液含有：●scFVDNA（1～4ug），50ul●水，33...
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