2014 11-07

蛋白質鹽析透析

一、蛋白質鹽析（一）目的要求了解蛋白質的沉淀作用，加深對影響蛋白質膠體分子穩定性因素的認識。（二）實驗原理水溶液中蛋白質分子由于表面生成水化層及蛋白質分子上某些基團離子化而使蛋白質分子表面帶有電荷，增...

2014 11-07

吸附法分離純化蛋白質

在蛋白質的提純方法中，選擇性吸附也是應用歷史較久迄今仍在廣泛采用的方法之一。早期工作常用高嶺土（我國的一種土質，其分子式大致是AL2O3·2SiO2·2H2O）、氧化鋁（AL2O3）及活性炭等吸附劑，...

2014 10-24

酵母RNA的提制

一、目的：學習和掌握從酵母中提制RNA的原理和方法，從而加深對核酸性質的認識。二、原理：提取和制備RNA的首要問題是選RNA含量高的材料。微生物是工業上大量生產核酸的原料，其中RNA的提制以酵母zui...

2014 10-24

血清中COMP檢測及臨床意義

背景介紹：COMPzui早被認為具有軟骨特異性，表達于軟骨細胞周圍的基質中，但近年研究表明，COMP在所有關節結構中均有表達，包括韌帶、半月板、肌腱、滑膜。此外，視網膜和血管平滑肌細胞內也能表達COM...

2014 10-11

蛋白質純化技術服務

蛋白質純化技術服務1、蛋白質純化服務流程①原始材料的澄清;②目的重組蛋白的捕獲(GST、His標簽蛋白);③破碎含有蛋白質的細胞;④蛋白質粗提，清除雜質:去除核酸、原生質體、不溶物或者洗滌包涵體等;⑤...

2014 10-11

ELISA技術服務

1、ELISA服務流程①待測抗原/抗體的獲得;②抗原/抗體的包被;③加入抗體/抗原，37℃溫育;④底物液顯色;⑤終止反應;⑥ELISA檢測儀檢測。注：根據ELISA方法不同，操作步驟有區別。2、ELI...

2014 09-26

細胞培養技術服務

細胞培養技術服務1、細胞培養服務流程①從動物組織切割、分離所需培養的組織(原代培養);②用滅菌PBS多次清洗組織，充分剪碎組織，用滅菌PBS清洗組織;③靜置數分鐘，使組織沉淀于管底，棄上清;④*充分消...

2014 09-26

MTT技術服務

MTT技術服務1、MTT服務流程①收集對數生長期細胞并計數;②接種細胞;配成單細胞懸液，接種于96孔板，接種密度為每孔103-104;③培養細胞：5%CO2，37℃孵育，培養1天～5天(需根據試驗目的...

2014 09-20

美國藥典（USP）簡介

U.S.Pharmacopeia/NationalFormulary《美國藥典/國家處方集》（簡稱USP/NF）。是由美國政府所屬的美國藥典委員會（TheUnitedStatesPharmacopei...

2014 09-20

制藥用水-2015中國藥典

水是藥物生產中用量大、使用廣的一種輔料,用于生產過程和藥物制劑的制備。本版藥典中所收載的制藥用水,因其使用的范圍不同而分為飲用水、純化水、注射用水和*。一般應根據各生產工序或使用目的與要求選用適宜的制...

2014 09-12

生長率測定法

生長率測定法——分離培養基從菌落數量上判斷分離培養基的選擇效果及抑制性質控菌株的選擇生化性狀典型的強陽性質控菌株生化性狀較弱的陽性質控菌株不同生化性狀的陽性質控菌株生長受到抑制的陰性質控菌株參考培養基...

2014 09-12

霉菌酵母菌樣品的稀釋

固體和半固體樣品：稱取25g樣品至盛有225mL滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖，即為1:10稀釋液。或放入盛有225mL無菌蒸餾水的均質袋中，用拍擊式均質器(不推薦使用刀片式均質器)拍打2min，制成...

2014 09-04

MTT實驗前注意事項及貼壁細胞/懸浮細胞實驗

實驗前應明確的問題1.選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大，因此，在進行mtt試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時...

2014 09-04

G418原代細胞的篩選的Protocol

分析轉化的功能和表達需要DNA穩定轉染至宿主細胞染色體。外源基因進入細胞后，部分能夠通過細胞質進入細胞核內，根據細胞類型，至多80%的進入核內的外源DNA得到瞬時表達。極少數情況下，進入細胞的外源DN...

2014 08-28

細胞計數實驗

實驗目的：掌握細胞計數的方法。了解區分細胞存活狀態的方法。實驗用品：0.4%臺盼藍溶液、無水乙醇或95%乙醇溶液、脫脂棉普通顯微鏡、試管、吸管、毛細吸管、細胞計數板、綢布。實驗原理：在細胞培養工作中，...

2014 08-28

白細胞計數法（試管法）

一、原理用稀乙酸將血液稀釋20倍，使紅細胞全部溶解，滴入白細胞計數池中，在顯微鏡下計數，求得每立方毫米血液中的白細胞數。二、器材和試劑1.器材生物顯微鏡、Neubauer氏血細胞計數池、0.02ml吸...

2014 08-23

SDS-PAGE膠的干燥方案

凝膠干燥時遇到的主要問題是凝膠的變形和破裂。將凝膠放在Whatman3MM濾紙上可防止干燥凝膠變形，但凝膠是否破裂取決于凝膠的厚度和干燥器的質量，因此，應盡量使用薄膠并使凝膠干燥器處于良好狀態，使其真...

2014 08-23

SDS-PAGE凝膠電泳凝膠的制備方法

SDS-PAGE電泳可用于分離蛋白質和核苷酸，這里綜述了SDS-PAGE實驗原理、試劑和器材、以及實驗操作步驟。一.實驗原理：SDS-PAGE是對蛋白質進行量化，比較及特性鑒定的一種經濟、快速、而且可...

2014 08-14

酵母培養方法

問：現在工作的地方老板要養酵母，我對酵母不是很了解，希望好心人發一些酵母的基本知識以及酵母培養注意的問題和培養基的配制甚么的，謝謝大家！答：酵母菌是一些單細胞真菌，目前已知有1000多種酵母。酵母可以...

2014 08-14

酵母總RNA提取方法

問：請問大家提取酵母的總RNA都用什么方法？有好用的試劑盒嗎？酵母總RNA提取應該注意什么？答：使用熱酚法抽提酵母RNA,很好用，至今沒有失敗過。(1)將酵母細胞培養在3ml選擇性培養基中，30℃過夜...