細胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體相關(guān)信息

抗體 （antibody, Ab） 
1、抗體的概念： 
*機體受到抗原刺激后，由漿細胞合成并分泌出一類具有與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白，被稱為抗體。 
-抗體主要存在于血清內(nèi)； 
-抗體都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白并不一定都是抗體。 
-免疫球蛋白根據(jù)重鏈的結(jié)構(gòu)及抗原特異性不同分為五種，既IgG、 IgD、IgE、 IgA、IgM。 

2、免疫組化實驗中常用的抗體：單克隆抗體和多克隆抗體。 
*單克隆抗體：是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體，是應用細胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動物制備的。 
-特異性強、抗體產(chǎn)量高。 
*多克隆抗體：是將純化后的抗原直接免疫動物后，從動物血中所獲得的免疫血清，是多個B淋巴細胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。 
-特異性低，會產(chǎn)生抗體的交叉反應。 
-多克隆抗體廣泛應用于石蠟包埋組織切片，可減少假陰性染色機會。 
-抗原與抗體的結(jié)合，要求量保持一定比例，當抗原或抗體過量時，是不能聚合成大顆粒。 
3、抗體的制備——多克隆抗體的制備 
*動物的選擇 
*佐劑（adjuvant） 
*免疫方法 
*免疫劑量 
*抗體效價的測定 
*放血或定期抽血 
（1） 動物的選擇  細胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體相關(guān)信息 
選擇什么動物來免疫取決于： 
*所需抗血清的量 
-小鼠只能提供1.0～1.5ml的血液，而山羊能提供幾升。 
*能供免疫用的抗原量 
g足夠，而山羊需要幾毫克。m-小鼠50 
（1） 動物的選擇（續(xù)） 
*動物的品系：免疫動物與提供抗原的動物之間的種系差異越大越好。 
-例如哺乳動物的抗原可選擇非哺乳動物來制備抗體。 
-常用的動物有兔、羊、馬、豬等，以兔（新西蘭兔，年輕，健壯，體重在2.5kg左右，雄性）為zui常用。 
（2） 佐劑 （adjuvant） 
*一般可溶性抗原注射后，迅速從注射部位擴散、吸收代謝。佐劑可延長潴留時間，且延長免疫刺激作用。因此在制備抗體的過程中，常將抗原和佐劑一起注射。 
*zui常用的佐劑是弗氏佐劑，又分為: 
-弗氏不*佐劑（Freund's incomplete adjuvant） 
-弗氏*佐劑（Freund's complete adjuvant） 
弗氏不*佐劑