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一、實驗目的學習外源DNA導入原核生物細胞的方法二、實驗內容熱激處理將外源質粒dna導入原核細胞。三、實驗原理利用CaCl2處理感受態體細胞，然后通過熱休克處理，即置于42℃高溫熱激90秒，熱休克后，...
DNA的重組(一)DNA的酶切與連接(1)酶切反應同質粒dna的鑒定，只不過是質粒DNA換為載體DNA。若大量酶切，則成比例增加。(2)加2倍體積的預冷無水乙醇和1/10體積的3mol/lNaAc混勻...
為了提高轉化效率,實驗中要考慮以下幾個重要因素：1.細胞生長狀態和密度:不要用經過多次轉接或儲于4℃的培養菌，從-70℃或-20℃甘油保存的菌種中直接轉接用于制備感受態細胞的菌液。細胞生長密度以剛進入...
酶切實驗本實驗學習用限制性核酸內切酶(Restrictionendonuclease)EcoRI切割λDNA及質粒pBR322DNA，瓊脂糖凝膠電泳后觀察酶切結果。【原理】λDNA是大腸桿菌的一種溫和...
A液：1M，MnCl2：B液：1M，HEPES，pH=6.2-6.8，用無菌水配，配后不需滅菌;C液稱取CaCl20.10g，KCl1.18g，全部轉入細口試劑瓶，然后加入46ml三蒸水，輕輕振蕩使所...
膠回收dna片段一、實驗目的1、了解分離純化DNA片段中的污染物方法和原理二、實驗原理首先利用低熔點瓊脂糖凝膠電泳DNA片段，分離目的條帶DNA，然后紫外光下切割含目的DNA條帶的膠塊，利用膠回收試劑...
1)DNA分子是由兩條長度相同，方向相反的多聚脫氧核苷酸鏈平行圍繞同一中心軸形成的雙排螺旋結構;兩螺旋都是右手螺旋，雙螺旋表面有深溝和淺溝。2)各脫氧核苷酸中磷酸和脫氧核糖基借磷酸二酯鍵相連形成的糖-...
選擇BLOCK-iT™DicerRNAi試劑盒，利用RNA干擾技術(RNAinterference，RNAi)進行簡單、快速的基因阻斷，您不必再花費時間設計siRNAoligo序列及檢測它...
1.5×CTABCTAB15g1MTris·Cl(pH8.0)75ml0.5MEDTA30mlNaCl61.4gaddddH2Oto1000ml0.5MEDTA(pH8.0)EDTA-Na·2H2O1...
簡并引物設計的方法(包括實際操作步驟)簡并引物是指用來編碼一段短肽序列的不同堿基序列的混合物。主要用來同源克隆未知的基因，或用來分析某一種基因多態性的一種方法。簡并引物設計的常見程序如下：1.利用nc...
質粒是細菌內的共生型遺傳因子，它能在細菌中垂直遺傳并且賦予宿主細胞特定的表型。質粒載體是在天然質粒的基礎上為適應實驗室操作而進行人工構建的。與天然質粒相比,質粒載體通常帶有一個或一個以上的選擇性標記基...
廣義的分子標記(molecularmarker)是指可遺傳的并可檢測的DNA序列或蛋白質。蛋白質標記包括種子貯藏蛋白和同工酶（指由一個以上基因位點編碼的酶的不同分子形式）及等位酶（指由同一基因位點的不...
DNA重組是將外源DNA與載體分子連接，這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。DNA重組的方法主要有粘端連接法和平端連接法。重組的DNA分子是在dna連接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的連接緩沖...
SSR簡單序列重復標記（Simplesequencerepeat,簡稱SSR標記），也叫微衛星序列重復，是由一類由幾個核苷酸（1－5個）為重復單位組成的長達幾十個核苷酸的重復序列，長度較短，廣泛分布在...
1、核酸抽提原理簡單地講，核酸抽提包含樣品的裂解和純化兩大步驟。裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的過程，純化則是使核酸與裂解體系中的其它成分，如蛋白質、鹽及其它雜質*分離的過程。經典的裂解液幾乎都...
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