瓊脂培養基的融化

將培養基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法（如高壓鍋中的層流蒸汽）使之融化。經過高壓的培養基應盡量減少重新加熱時間，融化后避免過度加熱。

融化后應短暫置于室溫中（如2 min）以避免玻璃瓶破碎。 融化后的培養基放入47℃～50℃的恒溫水浴鍋中冷卻保溫（可根據實際培養基凝固溫度適當提高水浴鍋溫度），直至使用。融化后的培養基應盡快使用，放置時間一般不應超過4 h。

未用完的培養基不能重新凝固留待下次使用。敏感的培養基尤應注意，融化后保溫時間應盡量縮短，如有特定要求可參考的標準。傾注到樣品中的培養基溫度應控制在約45℃左右。

培養基的脫氧

必要時，將培養基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15 min；加熱時松開容器的蓋子；加熱后蓋緊，并迅速冷卻至使用溫度（如FT 培養基）。

添加成分的加入

對熱不穩定的添加成分應在培養基冷卻至47℃～50℃時再加入。無菌的添加成分在加入前應先放置到室溫，避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。將加入添加成分的培養基緩慢充分混勻，盡快分裝到待用的容器中。