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上海金穗生物科技有限公司

DNA限制酶分析與切割

時(shí)間:2013-2-21閱讀:386
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儀器用具:
37℃及65℃水浴或恒溫槽

藥品試劑:
質(zhì)體pBluescript II SK (-)
限制酶:BamHI, PvuII 及ScaI (濃?均為10 units/μL, Invitrogen)
10×Reaction buffer 6 (0.5 M Tris-HCl, pH 7.4; 60 mM MgCl2; 0.5 M NaCl; 0.5 M KCl)
無菌水

方法步驟:
1) 取7 支微?離心管,依下表所?體積 (單位 μL) 依序加于管壁?同位置上。

◆ 每次吸取限制酶時(shí),請換一支新的微?移液器頭以免造成污染。
總體積為20 μL,短暫離心后,以微?移液器頭輕輕混合,#1 置冰浴中,其余各管置于37℃反應(yīng)1 h。
2) 置65℃水浴15 min 中止反應(yīng)后,移置冰浴?卻,即可進(jìn)?電泳分析。

 

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