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WEE1蛋白抗體相關(guān)信息,Anti-WEE1 protein
多采免疫雙向擴(kuò)散法
【基本原理】
*指抗原和抗體在同一凝膠內(nèi)都擴(kuò)散,彼此相遇后形成特異性的沉淀線。
-將抗原與抗體分別加入同一凝膠板中兩個(gè)相隔一定間距的小孔內(nèi),使兩者進(jìn)行相互擴(kuò)散,當(dāng)抗原抗體濃度之比相適宜時(shí),彼此相遇形成一白色弧狀沉淀線。
*優(yōu)缺點(diǎn):簡便,但敏感性較低,易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
免疫雙向擴(kuò)散法的操作步驟
*將玻璃板用水洗凈后用75%乙醇沖洗,晾干后放在水平臺(tái)上備用。
*將1%agar 融化后,置56℃水浴。
*在玻璃板上鋪膠,約1.5mm 厚,凝固后打孔(直徑 3rnm),孔間距10mm。
l 抗血清(抗體預(yù)先作系列倍比稀釋即 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。ml 抗原樣品,周圍孔內(nèi)每孔加5m*中心孔加5
*凝膠板置濕盒內(nèi),室溫?cái)U(kuò)散24h。
*觀察結(jié)果。
抗體效價(jià)檢測(cè)的其它方法
*環(huán)狀沉淀試驗(yàn),需較多的抗血清,現(xiàn)已很少用;
*對(duì)流免疫電泳,比瓊脂免疫雙擴(kuò)散法敏感,較簡便、實(shí)用;
*酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)。
放血或定期抽血 ge:EN-U?of ???nguage:ZH-CN; mso-bidi-language:AR-SA'>-NH2、-COOH等將半抗原結(jié)合到載體上。結(jié)合比例為5kDa結(jié)合5~25個(gè)分子的小肽。
常用以下3種方法
*頸動(dòng)脈放血法:放血量較多,動(dòng)物不易中途死亡。例如:2.5kg白兔可放血約80ml。家兔、山羊、綿羊等動(dòng)物采血常用此法。
*心臟采血法:常用于家兔、豚鼠、大白鼠、雞等小動(dòng)物,但操作不當(dāng)易引起動(dòng)物死亡。
*靜脈采血:家兔可用耳緣靜脈采血;山羊、綿羊、馬和驢可用頸靜脈采血,這種放血法可隔日1次,有時(shí)可采集多量血液
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