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ATP結(jié)合蛋白家族6抗體說明,Anti-ABCB6

時(shí)間:2013-2-25閱讀:319
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ATP結(jié)合蛋白家族6抗體說明,Anti-ABCB6

免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表著機(jī)體體液免疫的水平,并進(jìn)一步代表著B細(xì)胞的功能,因此測(cè)定血清Ig含量可以推知機(jī)體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。
隨著免疫學(xué)的發(fā)展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為*的手段。純化的方法很多,有單一法,但大多數(shù)采用二步法以上相結(jié)合的方法,特別是以硫酸銨提純?yōu)榛A(chǔ),再經(jīng)過層析柱的方法來提高免疫球蛋白及其各成分的純度zui為常用。
硫酸銨溶液能使蛋白質(zhì)膠體脫水并中和其電荷而使之沉淀下來(稱為鹽析)。不同濃度的硫酸銨鹽析蛋白成分不同,利用這一原理提取所需的免疫球蛋白成分。鹽析只能粗提,為了獲得純化的免疫球蛋白成分,必須進(jìn)一步采用層析的方法進(jìn)行分離。
免疫球蛋白包括IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。

IgG的分離與提純(一)材料與試劑配制 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體說明,Anti-ABCB6 
1.動(dòng)物血清
2.硫酸銨飽和溶液
硫酸銨            800g~850g

H2O               1 000ml
加熱至絕大部分溶質(zhì)溶解為止,趁熱過濾,置室溫過夜,然后以28%NH4OH調(diào)pH至7.0(不調(diào)pH值也可以)。
注:硫酸銨以質(zhì)量?jī)?yōu)者為佳,因次品中含有少量重金屬對(duì)蛋白質(zhì)巰基有影響。如次品必須除去重金屬,可在溶液中通入H2S,靜置過夜后濾過,加熱蒸發(fā)H2S即可。
3.0.01Mol/L pH7.4PB液
A液:0.10Mol/L NaH2PO4液
NaH2PO4•2H2O        15.60g
加H2O至            1 000.ml
B液:0.10Mol/L Na2HPO4液
Na2HPO4•12H2O        35.80g
加H2O至              1 000ml
取A液19ml,B液81ml加水至1 000ml即可。
4.1%BaCl2溶液
5.納氏液
HgI           115.00g
KI            80.00g
加H2O至    500.00ml
溶化后過濾,然后再加20%NaOH500.00ml,混合即可。
6.0.50 Mol/L的HCl液和0.50 Mol/L的NaOH液。
7.洗脫液:0.03Mol/L的NaCl液。
8.透析袋(或玻璃紙)。

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