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西安百螢生物科技有限公司
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胱天蛋白酶Caspase 系列產品實驗方案

時間:2023/8/15閱讀:49
分享:

產品型號:13406.13407.13408.13409

FITC-C6(C3)-DEVD-FMK能提供簡便靈敏的方法對活細胞中對的caspase進行檢測。FITC-C6(C3)-DEVD-FMK在凋亡細胞中具有通透性,性和不可逆結合的caspase-3的特點,是帶有FITC熒光標記的caspase-3抑制劑。FITC標記能直接通過熒光顯微鏡,流式細胞儀或者熒光酶標儀測定的Caspase。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優質的胱天蛋白酶Caspase 3/7熒光底物 FITC-C6(C3)-DEVD-FMK 綠。

實驗方案

操作方法

以下協議僅提供指導,應根據您的特定需求進行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常規解決方案胱天蛋白酶測定

1.在DMSO中準備10 mM的儲備溶液。

2.如下準備2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.將等體積的半胱天冬酶標準品或樣品與2X半胱天冬酶底物測定溶液混合,并在室溫下孵育至少1小時。

4.使用熒光酶標儀監測熒光,或使用酶標儀監測吸光度。 

使用細胞滲透性FMK Caspase探針的細胞Caspase測定

1.在DMSO中準備2-5 mM的儲備溶液。

2.根據需要處理細胞。

3.通過用20 mM Hepes緩沖液(HHBS)在Hanks中稀釋DMSO儲備溶液(來自步驟2.1),制備2X滲透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.將等體積的處理過的細胞與2X半胱天冬酶底物測定溶液混合(來自步驟2.3),并在37°C,5%CO2的培養箱中孵育細胞至少1小時。

5.用HHBS清洗細胞至少一次。

6.通過流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監測熒光強度。 

使用細胞滲透性FMK Caspase探針進行細胞半胱天冬酶測定(僅適用于#13470-13476)

1.通過向小瓶中加入50 µL DMSO制備250X儲備液。

2.根據需要處理細胞。

3.以1:250的比例將250 X DMSO儲備溶液添加到細胞溶液中(例如2 µL至500 µL細胞),并將細胞在37°C,5%CO2的培養箱中孵育1小時。

4.用HHBS清洗細胞至少一次。

5.通過流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監測熒光強度。

 

 


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