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科研實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞計(jì)數(shù)與存活測試2017/9/12
1、原理:(1)計(jì)算細(xì)胞數(shù)目可用血球計(jì)數(shù)盤或是Coultercounter粒子計(jì)數(shù)器自動(dòng)計(jì)數(shù)。(2)血球計(jì)數(shù)盤一般有二個(gè)chambers,每個(gè)chamber中細(xì)刻9個(gè)1mm2大正方形,其中4個(gè)角落之正...
江蘇菲亞為您解析如何調(diào)控干細(xì)胞命運(yùn)2017/9/7
zui近,研究人員通過用光學(xué)鑷子擠壓附著于人類干細(xì)胞外部的一個(gè)微珠,發(fā)現(xiàn)了機(jī)械力如何引發(fā)細(xì)胞中的一個(gè)關(guān)鍵信號(hào)通路。研究表明,擠壓有助于釋放細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存的鈣離子,并打開細(xì)胞膜上的通道,允許離子流入細(xì)胞。研...
冷凍細(xì)胞活化的方法2017/9/6
1、冷凍細(xì)胞之活化原則為快速解凍,以避免冰晶重新結(jié)晶而對(duì)細(xì)胞造成傷害,導(dǎo)致細(xì)胞之死亡。2、細(xì)胞活化后,約需數(shù)日,或繼代一至二代,其細(xì)胞生長或特性表現(xiàn)才會(huì)恢復(fù)正常(例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋白質(zhì))。3、...
多克隆抗體2017/8/21
(一)多克隆抗體的概念抗原刺激機(jī)體,產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。抗原通常是由多個(gè)抗原...
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫方案2017/8/18
1、抗原:蛋白質(zhì)、多肽、細(xì)胞器、細(xì)胞、組織等。2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等。3、不同動(dòng)物免疫所需抗原量(以蛋白免疫為例)動(dòng)物:抗原量兔子:20-200ug小鼠:2-40ug大...
蛋白質(zhì)濃度測定:紫外分光光度法2017/8/14
蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì),其吸收高峰在280nm波長處,且在此波長內(nèi)吸收峰的光密度值與其濃度成正比關(guān)系,故可作為蛋白質(zhì)定量測定的依據(jù),但由于各種...
多克隆抗體的制備2017/8/8
一、器材剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼科手術(shù)鑷子(游離血管用)一把、直頭眼科手術(shù)剪(剪血管用)一把,手術(shù)刀架,手術(shù)刀片,注射器(1ml、10ml,25ml)附針頭,兔子固定架,滅菌三角燒瓶(200ml)...
雜交瘤的克隆化及凍存與復(fù)蘇2017/8/4
1.雜交瘤的克隆化雜交瘤克隆化一般是指將抗體陽性孔進(jìn)行克隆化。因?yàn)榻?jīng)過HAT篩選后的雜交瘤克隆不能保證一個(gè)孔內(nèi)只有一個(gè)克隆。在實(shí)際工作中,可能會(huì)有數(shù)個(gè)甚至更多的克隆,可能包括抗體分泌細(xì)胞、抗體非分泌細(xì)...
原代組織細(xì)胞的解離2017/7/31
原代組織細(xì)胞的解離膠原酶1.用滅菌的解剖刀或剪刀將組織切成3-4mm大小碎塊。用Hanks平衡鹽溶液(HBSS)將組織碎塊清洗數(shù)次。2.加入膠原酶(50-200單位/ml膠原酶HBSS)。3.在37℃...
細(xì)胞的復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)2017/7/27
一.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。二.取出凍存管:1.根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按...
蛋白質(zhì)定義及概述2017/7/25
蛋白質(zhì)是一種復(fù)雜的有機(jī)化合物,舊稱“朊(ruǎn)”。氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位,氨基酸通過脫水縮合連成肽鏈。蛋白質(zhì)是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子,每一條多肽鏈有二十至數(shù)百個(gè)氨基酸殘基(-R)...
常用生化試劑的作用(下篇)2017/7/20
1.PVPPPVPP對(duì)片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。2.PIPES哌*-N,N'-...
牛血清白蛋白的主要成分2017/7/17
牛血清白蛋白是牛血清中的一種球蛋白,包含607個(gè)氨基酸。牛血清白蛋白的主要成分有:1.蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。纖維粘連素...
斜面培養(yǎng)基的制作方法2017/7/11
斜面培養(yǎng)基相對(duì)和并列的概念是:平面培養(yǎng)基、高層培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基倒在培養(yǎng)皿內(nèi),凝固成平面的稱為平板培養(yǎng)基,用于菌種分離及研究菌類的某些特性;分裝在試管內(nèi),直立凝固而制成的稱為高層培養(yǎng)基,這樣接入菌種后...
緩沖液的作用和使用2017/7/6
緩沖液在生物學(xué)試驗(yàn)中起著舉足輕重的作用,它是溶液中維持溶液pH相對(duì)穩(wěn)定,能“中和”外加酸或堿的化學(xué)成分。一般來說,緩沖液是弱酸及其共軛堿(如乙酸和乙酸納)或弱堿及其共軛酸(如氨和氯化銨)組成的溶液,其...

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