美國BioAssay Systems酮體測試盒（KIT）

產品包裝：100T
產品產地：BioAssay Systems

產品說明:

酮體（乙酰乙酸和3-羥基丁酸）主要由脂肪酸氧化, 在肝臟內產生，正常情況下尿液和血液中的酮體濃度很低。血液中酮體濃度升高可導致代謝性酸中毒，這往往與糖尿病、兒童低血糖、生長激素缺乏、酒精或水楊酸中毒及先天性代謝缺陷有關。 

簡單、直接、自動化的乙酰乙酸（AcAc）和3-羥基丁酸（BOH）檢測手段廣受親睞。本公司生產的酮體測試盒是基于3-羥基丁酸脫氫酶催化反應，在340nm處讀取的NADH吸光度的變化便與AcAc 和 BOH的濃度直接相關。

美國BioAssay Systems酮體測試盒（KIT）

適用范圍:

直接檢測血清、血漿、尿液和其它生物樣品中的酮體濃度。

產品特點:

敏感且準確：用10mL樣品。采用96孔板檢測，線性檢測范圍0.12 - 8 mM酮體。 

簡便：檢測過程中只需加入一種工作試劑，并在室溫下讀取吸光度。 

高通量：該高通量96孔板檢測方法易于自動化，每天可處理大量樣品。

試劑盒規格（96孔板200檢測）

儲存條件：所有試劑均在-20°C下保存。保質期至少6個月。 

預防措施：本產品僅供研究用。使用過程中應嚴格遵循實驗安全措施。

檢測步驟:

樣品準備：血清和血漿樣品應為未溶血樣品，取樣后應立即檢測。如果未能立即檢測，則應在-80°C下保存，但不得超過30天。 

試劑準備：檢測前將所有試劑放至室溫。實驗過程中，將HBDH酶試劑保持在冰上或冰箱里（2-8°C）。

AcAc 檢測

1. 標準品：將5 mL AcAc標準品與45 mL蒸餾水混合得到8 mM 稀釋后的標準品。將5 mL水和5 mL8 mM 的AcAc標準品分別加入透明平底96孔板的孔中。

樣品：將5 mL 樣品分別加入2個孔中，1個為樣品孔，另1個為樣品空白孔。 

2. 反應：按如下比例為每個水、標準品和樣品孔準備工作試劑：將195mL AcAc 緩沖液、8mL AcAc 試劑和0.5mL HBDH 酶試劑混勻。按如下比例為每個空白孔準備空白試劑：將195mL AcAc 緩沖液和8mL AcAc 試劑混勻（即不加入酶試劑）。

將195mL工作試劑加入水、標準品和樣品孔中。將195mL空白試劑加入樣品空白孔中。輕敲孔板使其混合。

3. 室溫下培養5分鐘。在340nm處讀取吸光度（OD340nm）。根據水、8mM標準品、樣品和樣品空白孔的OD值計算乙酰乙酸 (AcAc) 的濃度。

BOH檢測

1. 標準品：將5 mL BOH標準品與45 mL蒸餾水混合得到8 mM 稀釋后的標準品。將5 mL水、5 mL 8 mM 的BOH標準品分別加入透明平底96孔板的孔中。 

樣品：將5 mL 樣品分別加入2個孔中，1個為樣品孔，另1個為樣品空白孔。 

2. 反應：按如下比例為每個水、標準品和樣品孔準備工作試劑：將195mL BOH 緩沖液、8mL BOH 試劑和0.5mL HBDH 酶試劑混勻。按如下比例為每個空白孔準備空白試劑：將195mL BOH緩沖液和8mL BOH 試劑混勻（即不加入酶試劑）。

將195mL工作試劑加入水、標準品和樣品孔中。將195mL空白試劑加入樣品空白孔中。輕敲孔板使其混合。

3. 室溫下培養15分鐘并讀取OD340nm。根據樣品、樣品空白、標準品和水的OD值計算3-羥基丁酸（BOH）的濃度。      

總酮體（TKB）的濃度計算如下：

       [TKB] = [AcAc] + [BOH]

注：若計算出的[AcAc] 或 [BOH] 濃度高于8 mM，需用水稀釋樣品并重復檢測，結果需乘稀釋系數。

實驗必需品（未提供）:

吸液用儀器（多通道加樣器），透明平底96孔板，96孔板吸光率閱讀器。

乙酰乙酸（AcAc）和3-羥基丁酸（BOH）標準曲線

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