其它系列_植酸酶(phytase)測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類(lèi)水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類(lèi)酶的總稱(chēng),屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。
其它系列_植酸酶(phytase)測(cè)試盒
測(cè)定原理:
植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物,無(wú)機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋,超聲溶解器,回旋式振蕩器。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
緩沖液:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1支,4℃保存,臨用前加緩沖液6mL配制,現(xiàn)用現(xiàn)配;用不完的試劑4℃保存一個(gè)月。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。
顯色劑:粉劑×8瓶,4℃保存,臨用前根據(jù)用量每瓶加0.4mL雙蒸水溶解,再加1.6mL試劑二混勻。
樣本處理:
1.酶制劑:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:500~1000的比例(建議稱(chēng)取約0.001g,加入1mL提取液)加入提取液,在超聲波溶解器上溶解15min,再用回旋式振蕩器振蕩15min,待測(cè)。
2.組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,在超聲波溶解器上溶解15min,再用回旋式振蕩器振蕩15min,4℃,4000g離心10min,取上清待測(cè)。
3.飼料樣品:飼料烘干粉碎,過(guò)40目篩,按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,在超聲波溶解器上溶解15min,再用回旋式振蕩器振蕩15min,4℃,4000g離心10min,取上清待測(cè)。
4.培養(yǎng)液等液體樣品,混勻直接測(cè)定。