微量法_海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
注 意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
海藻糖是由兩個(gè)葡萄糖分子以α，α-1-1 糖苷鍵連接而成的一種非還原雙糖，廣泛存在于細(xì)菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆蟲、無(wú)脊椎動(dòng)物和高等植物等多種有機(jī)體中。海藻糖的非還原性決定了它對(duì)酸、堿、高溫等的穩(wěn)定性。另外，它本身具有很強(qiáng)的吸水性，使它在生物體內(nèi)具有抗脫水作用，在逆境條件下可通過(guò)識(shí)別外界刺激、產(chǎn)生和傳遞信號(hào)、基因表達(dá)和代謝調(diào)節(jié)來(lái)保護(hù)植物免受不良環(huán)境的傷害。
微量法_海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測(cè)試盒
植物體內(nèi)主要以葡萄糖為底物合成海藻糖，該反應(yīng)首先在海藻糖-6-磷酸合成酶（trehalose-6-phosphate synthase，TPS）的作用下，催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）和 6-磷酸葡萄糖反應(yīng)生成中間產(chǎn)物6-磷酸海藻糖，再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶 （trehalose6-phosphate phosphatase，TPP）的作用下去磷酸化，生成海藻糖。因此，測(cè)定TPS活性對(duì)于研究植物逆境具有重要意義。
測(cè)定原理：
TPS 催化 UDPG 與 G6P 生成海藻糖-6-磷酸，同時(shí)產(chǎn)生 UDP；UDP 在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下，氧化 NADH 為 NAD+，NADH 的下降速率與 UDP 含量成正比，通過(guò) 340nm 吸光度下降速率反映 TPS 活性。
需自備的儀器和用品：
酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨用前加入 12mL 試劑五溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑二：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入 10mL 試劑五溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用；
試劑三：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存；臨用前加入 0.1mL 試劑五溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑四：100μL×1 瓶，4℃避光保存；臨用前低速離心，以防止試劑沾在管壁；試劑五：液體 50mL×1 瓶，4℃保存；
工作液的配制：臨用前，先配置好試劑二和試劑三，然后取試劑二一瓶，加入 10μL 試劑三和 10μL 試劑四，充分混勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。
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