微量法_海藻糖合成酶(TS)測試盒
測定方法:微量法
產品規格:100管/48樣
注 意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩定性、抗凍結性等特性,是細胞在不良環境條件下產生的一種重要的抗逆應激物之一,它對生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關鍵途徑之一。
微量法_海藻糖合成酶(TS)測試盒
測定原理:
TS 催化麥芽糖產生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。
需自備的儀器和用品:
酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 12mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 12ml×1 瓶,4℃保存,充分混勻,如有沉淀,靜置后取上層清液使用;
試劑三:液體 10ml×1 瓶,4℃避光保存;
試劑四:液體 10ml×1 瓶,4℃避光保存;
樣品測定的準備:
1、細菌或細胞的處理:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3S,間隔 10S,重復 30 次);8000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、組織的處理:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),冰浴中勻漿。8000g ,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。