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上海紀寧實業有限公司

當前位置:上海紀寧實業有限公司>>生化測試盒>>乙醛酸循環系列>> 50管/48樣順烏頭酸酶(ACO)測試盒_ 乙醛酸循環系列

順烏頭酸酶(ACO)測試盒_ 乙醛酸循環系列

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50管/48樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-26 16:31:44瀏覽次數:676次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
順烏頭酸酶(ACO)測試盒_ 乙醛酸循環系列由上海紀寧生物公司提供,包括ACO檢測試劑盒說明書,免費代測,規格,包裝,品牌等關于有關本司測試盒所有產品的詳細介紹。

順烏頭酸酶(ACO)測試盒_ 乙醛酸循環系列

測定方法:分光光度法

產品規格:50管/48樣

注 意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

順烏頭酸酶(aconitase),三羧酸循環中的酶,催化檸檬酸轉變為異檸檬酸。檸檬酸本身不易氧化,在順烏頭酸酶作用下,通過脫水與加水反應,使羥基由β碳原子轉移到α碳原子上,生成易于脫氫氧化的異檸檬酸,為進一步的氧化脫羧反應作準備。

順烏頭酸酶(ACO)測試盒_ 乙醛酸循環系列

測定原理:

ACO 催化檸檬酸轉化成異檸檬酸,異檸檬酸氧化脫羧將 NAD+ 還原生成 NADH,導致 340nm 處光吸收上升。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

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試劑的組成和配制:

試劑一:50mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:10mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑三:1mL×1 支,-20℃保存;

試劑四:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;

試劑五:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑六:粉劑×1 支,-20℃保存;臨用前加 3mL 蒸餾水充分溶解;現配現用

試劑七:粉劑×1 支,4°保存;臨用前加 36mL 試劑四充分溶解;

工作液:臨用前在 36mL 試劑七中加入 3mL 蒸餾水、3mL 試劑四、3mL 試劑五、3mL 試劑六充分混勻

樣本的前處理:

組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:

1、稱取約 0.1g 組織或收集 500 萬細胞,加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

2、將勻漿轉入離心管內 600g,4℃離心 5min。

3、棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心 10min。

4、上清液即胞漿提取物,可用于測定胞質順烏頭酸酶活性。

5、在步驟④的沉淀中加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率 20%或200W,超聲 3 秒,間隔 10 秒,重復 30 次),用于線粒體順烏頭酸酶活性測定。

測定步驟

1、分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 340nm,蒸餾水調零。

2、樣本測定

(1)將工作液,置于 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 10min;現配現用;若分次用將工作液分裝后于-20°保存,一星期內可用。

(2)在 1mL 石英比色皿中加入 100μL 樣本 900μL 工作液,混勻,立即記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 3min20s 后的吸光值 A2,計算ΔA=A2-A1。

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