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當(dāng)前位置:上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司>>生化測(cè)試盒>>乙醛酸循環(huán)系列>> 50管/48樣蘋果酸合酶MS測(cè)試盒_ 乙醛酸循環(huán)系列分光法

蘋果酸合酶MS測(cè)試盒_ 乙醛酸循環(huán)系列分光法

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50管/48樣

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時(shí)間:2022-07-26 16:21:44瀏覽次數(shù):847次

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品牌 紀(jì)寧生物 貨期 現(xiàn)貨供應(yīng)
有效期 6個(gè)月 用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)使用
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蘋果酸合酶MS測(cè)試盒_ 乙醛酸循環(huán)系列分光法

測(cè)定方法:分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

注 意:正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)

定測(cè)定意義:

蘋果酸合酶(MS,EC 4.1.3.2)是屬于轉(zhuǎn)移酶中酰基轉(zhuǎn)移酶的一類,主要存在于植物和微生物中。MS 是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,在 MS 催化下乙醛酸與乙酰輔酶 A 反應(yīng)生成蘋果酸。

測(cè)定原理:

MS 催化乙酰 CoA 和乙醛酸產(chǎn)生蘋果酸,同時(shí)生成輔酶 A,輔酶 A 使無色的 DTNB 轉(zhuǎn)變成的 TNB,在 412nm 處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品:

分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰、和蒸餾水

試劑組成和配制:

試劑一:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 25 mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 25mL 試劑一充分溶解后使用,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 6 mL 試劑一充分溶解后使用,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

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樣本的前處理:

1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一),進(jìn)行冰浴勻漿,8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

蘋果酸合酶MS測(cè)試盒_ 乙醛酸循環(huán)系列分光法

測(cè)定步驟:

1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 412nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測(cè)定

在1mL 玻璃比色皿中依次加入 100μL 樣本、400μL 試劑二,400μL 試劑三和 100μL 試劑四,混勻,立即記錄 412 nm 處反應(yīng) 5min 時(shí)的吸光值 A1 和 10min 時(shí)的吸光值 A2,計(jì)算ΔA=A2-A1。


異檸檬酸裂解酶(ICL)測(cè)試盒_乙醛酸循環(huán)系列

異檸檬酸裂解酶(ICL)測(cè)試盒_乙醛酸循環(huán)系列由上海紀(jì)寧生物公司提供,

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檸檬酸合酶CS測(cè)試盒_乙醛酸循環(huán)系列_分光法

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