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使用時(shí)溫浴的方法:
1)加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2)各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3)為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4)加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。
5)如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
造成elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果不滿意的原因:
(1)試劑盒、樣品用前未平衡至室溫。
(2)必須在有效期內(nèi)使用,超過有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào)。
(3)加入試劑的體積和時(shí)間有誤,移液器計(jì)量不準(zhǔn),吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔。
(4)試劑盒沒有按規(guī)定進(jìn)行保存,受高溫影響。
(5)洗板及加樣過程中,酶標(biāo)受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力。
(6)洗板次數(shù)過多,或濃縮洗液稀釋倍數(shù)不符合要求,洗滌沖擊力太大,浸泡時(shí)間太長(zhǎng)。
(7)孵育時(shí)間及孵育溫度未達(dá)到要求,反應(yīng)板放入培養(yǎng)箱時(shí)注意溫度并及時(shí)調(diào)整。
(8)底物作用時(shí)間不夠。
(9)蒸餾水水質(zhì)有問題。
(10)顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入。
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