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免疫親和柱常見問題解答

時間:2014-2-25閱讀:2646
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  1)什么是親和柱?工作原理是什么?
  
  答:親和柱的全稱為免疫親和層析柱(immnuoaffinitychromatographycolumns,IAC),常簡稱為:親和柱、免疫親和柱、親和層析柱等。它是利用抗原抗體特異性可逆結合特性的SPE技術,根據抗原抗體的高選擇性,從復雜的待測樣品中提取目標化合物。主要原理是將抗體與惰性微珠共價結合,然后裝柱,將抗原溶液過免疫親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,zui后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原。
  
  2)親和柱抗體的來源是什么?
  
  答:親和柱使用的抗體可以是單克隆抗體,也可以是多克隆抗體。多克隆抗體具有生產工藝簡單,效價通常較高等特點,但也有交叉反應率高,生產批次之間差異大的缺點。單克隆抗體是由穩(wěn)定的雜交瘤細胞傳代產生,具有高特異性、高均一性,有效的避免了批間差,這對于產品質量的穩(wěn)定有決定性的效果。
  
  百奧宜康的真菌毒素免疫親和柱均使用價的單克隆抗體制備。
  
  3)親和柱的生產周期是多長時間?是否有常規(guī)庫存?zui短供貨時間是多久?
  
  答:親和柱的生產周期與抗體的庫存量相關。在抗體庫存量充足時,生產周期一般為4-5天(如果數量較大,會有一定的延遲)。常用的黃曲霉毒素系列三種親和柱一般有5-10盒的庫存。有現貨的親和柱供貨時間為一周(物流特別不方便的地區(qū)會有延遲)。
  
  4)親和柱的產品規(guī)格和相關技術參數是什么?
  
  答:親和柱主要的產品規(guī)格為:柱容量,回收率和柱容積。其他的參數包括生產日期,批次,儲存條件,有效期等。主要參數請查閱產品說明書。
  
  5)親和柱的保質期多長?儲存條件有什么要求?
  
  答:百奧宜康的親和柱保質期為1年-1.5年。儲存條件為4℃-30℃,并以4℃-8℃的保存條件*。切記0℃以下的低溫,因為緩沖液凍結,會嚴重影響親和柱內的物理結構,對親和柱的質量影響很大。
  
  6)溫度對實驗結果有什么影響?
  
  答:抗原抗體發(fā)生反應的*溫度是在25℃左右,所以實驗需要的環(huán)境溫度是室溫25℃左右,太高或太低的溫度都會對親和柱的回收率有一定的影響。親和柱在使用前如果在4-8℃環(huán)境下保存,也需要恢復至室溫在進行實驗。0℃以下的環(huán)境溫度,不適合實驗的進行。
  
  7)親和柱每月產能是多少?
  
  答:親和柱每月的產能主要和抗體的存量相關,在原料能夠保證的條件下,目前可以達到月產能1萬支的目標。
  
  8)親和柱包裝是什么規(guī)格?報價和實際成交價是多少?
  
  答:親和柱的包裝規(guī)格一般為25支每盒,黃曲霉毒素總量,B1,M1的市場報價均為3000元/盒,給經銷商的價格一般為2000-2400元。
  
  9)如果你們的產品快要過期,能否給予調換?
  
  答:我們給客戶的商品一般都有1年左右的有效期,如果客戶未能在效期內使用完,可以與我們溝通協商更換事宜。
  
  10)黃曲霉毒素總量、B1和M1親和柱的差異是什么?
  
  答:黃曲霉毒素總量、B1和M1親和柱的主要差異在于使用的抗體不同。黃曲霉毒素中親和柱使用的抗體要求對黃曲霉毒素G1,G2,B1,B2以及M1都要有比較好的交叉反應率,黃曲霉毒素B1親和柱使用的抗體則要求只能對黃曲霉毒素B1有很強的特異性,對其他幾種黃曲霉毒素的交叉反應率要接近0。黃曲霉毒素M1親和柱使用的抗體要求對黃曲霉毒素M1有很高的效價,但也容許對其它幾種黃曲霉毒素有一定的交叉反應。適用于HPLC的黃曲霉毒素M1親和柱因為進樣量較大,在柱容積上采用3ml的柱具,大于黃曲霉毒素總量和B1的1ml柱具。
  
  11)黃曲霉毒素總量、B1和M1親和柱都適用于何種樣品?
  
  答:黃曲霉毒素總量和B1親和柱適用于各種谷物,糧油酒類,奶制品,副食品,飼料等樣品,黃曲霉毒素M1親和柱適用于牛奶,奶粉以及奶酪奶油等奶制品樣品。其中黃曲霉毒素B1親和柱是*適用于熒光計法,檢測樣品中的黃曲霉毒素B1含量的免疫親和柱。
  
  12)國家對親和柱的使用有那些相關規(guī)定,具體內容是什么?
  
  答:相關國家標準中黃曲霉毒素總量和B1免疫親和柱并沒有明確的規(guī)定,但是為了實驗結果的盡可能準確,一般要求免疫親和柱的回收率能大于70%。在GB5413.37-2010中HPLC法中對黃曲霉毒素M1免疫親和柱的規(guī)定為:免疫親和柱應該含有黃曲霉毒素M1的抗體。親和柱的zui大容量不小于100ng黃曲霉毒素M1(相當于50mL濃度為2mg/L的試樣)、當標準溶液含有4ng黃曲霉毒素M1(相當于相當于50mL濃度為80ng/L的試樣)時回收率不低于8,0%。
  
  13)國家對親和柱是否有批量檢查驗收制度,你們如何保證產品質量?
  
  答:沒有相關的制度。但是企業(yè)對自己的產品必須有相應的質檢制度。我們的親和柱在出廠前會經過嚴格的測試,批次隨機抽樣,進行3-4個濃度水平實驗,保證產品變異系數小于15%。回收率等關鍵參數符合說明書上的標準。
  
  14)使用親和柱凈化的優(yōu)缺點是什么?
  
  答:因為親和柱的高特異性,使用親和柱凈化可以獲得純凈的樣品提取物,如同標準品般純凈的提取物可以用相對簡單常見的檢測方式獲得準確的定量檢測結果,這對于微量甚至痕量分析很重要。在樣品凈化過程中,使用親和柱同時避免了常規(guī)液液萃取中大量有機溶劑的使用,加強了對實驗員的保護。
  
  缺點就是成本要稍高一些。
  
  15)熒光計法、HPLC法和液質聯用法的區(qū)別是什么?
  
  答:GB5413.37-2010中使用的熒光計法、HPLC法和液質聯用法首先都是利用免疫親和柱凈化樣品,然后再利用黃曲霉毒素M1本身的熒光性利用熒光計法、HPLC法以及液質聯用法進行檢測。熒光計法的基礎是利用親和柱凈化后獲得的純凈的提取物,其熒光強度和黃曲霉毒素M1成正比。HPLC法和液質聯用法也需要相對純凈的提取物才能減少干擾,獲得準確的數值。液質聯用法與HPLC法的主要區(qū)別就是利用質譜代替HPLC中的熒光檢測器,作為zui終定量定性的檢測器。
  
  上海友騰生物科技有限公司是一家專業(yè)的生物試劑銷售公司。公司主要經營ELISA試劑盒、血清、培養(yǎng)基、抗體等生物試劑產品,可以為您提供ELISA試劑盒免費。

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