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上海友騰生物科技有限公司

微核檢測技術

時間:2014-3-12閱讀:397
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一、實驗目的

學會利用所學知識,進行自主實驗設計;了解染色體畸變的各種類型及原理,掌握利用微核檢測技術監(jiān)測環(huán)境污染的一般方法。

二、實驗原理

微核(micronucleus, 簡稱MCN),也叫衛(wèi)星核,是真核類生物細胞中的一種異常結構,是染色體畸變在間期細胞中的一種表現(xiàn)形式。微核往往是各種理化因子,如輻射、化學藥劑對分裂細胞作用而產(chǎn)生的。在細胞間期,微核呈圓形或橢圓形,游離于主核之外,大小應在主核1/3以下。微核的折光率及細胞化學反應性質和主核一樣,也具合成DNA的能力。一般認為微核是由有絲分裂后期喪失著絲粒的染色體斷片產(chǎn)生的。有實驗證明,整條染色體或幾條染色體也能形成微核。這些斷片或染色體在分裂過程中行動滯后,在分裂末期不能進入主核,便形成了主核之外的核塊。當子細胞進入下一次分裂間期時,它們便濃縮成主核之外的小核,即形成了微核。

已經(jīng)證實,微核率的大小是和作用因子的劑量或輻射累積效應呈正相關,這一點與染色體畸變的情況一樣。所以許多人認為可用簡易的周期微核計數(shù)來代替繁雜的中期畸變?nèi)旧w計數(shù)。由于大量新的化合物的合成,原子能的應用,各種各樣工業(yè)廢物的排出等都存在污染環(huán)境的可能性,欲了解這些因素對機體潛在的遺傳危害,需要有一套高度靈敏,技術簡單易行的測試系統(tǒng)來監(jiān)測環(huán)境的變化。只有真核類的測試系統(tǒng)更能直接推測誘變物質對人類或其它高等生物的遺傳危害,在這方面,微核測試是一種比較理想的方法。目前國內(nèi)外不少部門已把微核測試用于輻射損傷、輻射防護、化學誘變劑、新藥試驗、食品添加劑的安全評價,以及染色體遺傳疾病和癌癥前期診斷等各個方面。

三、實驗材料

蠶豆(vicia faba, 2n=12)干種子。

四、實驗儀器及用具

顯微鏡、手動計數(shù)器、鑷子、載玻片、蓋玻片、燒杯、瓷盤、培養(yǎng)箱、分析天平、水浴鍋、酒精燈、剪刀、解剖針、濾紙、鉛筆、標簽紙、膠水等。

五、藥品和試劑

根據(jù)學生試驗設計要求,提供相應的藥品和試劑。

六、實驗步驟

(一)實驗設計

學生可選擇不同的方法自行設計進行材料的誘變處理,并將試驗設計交指導老師審核后進行試驗操作。

(二)實驗實施

學生根據(jù)實驗設計獨立進行實驗實施。并撰寫實驗報告。

七、實驗作業(yè)

產(chǎn)生微核的根尖細胞在分裂中期可能出現(xiàn)什么樣的分裂圖

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