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食品衛生微生物檢驗實驗室操作要求(下)

2011年05月18日 11:34:24人氣:1278來源:青島海博生物技術有限公司

四、有毒有菌污物處理要求

    微生物實驗所用實驗器材、培養物等未經消毒處理,一律不得帶出實驗室。
    1. 經培養的污染材料及廢棄物應放在嚴密的容器或鐵絲筐內,并集中存放在地點,待統一進行高壓滅菌。
    2. 經微生物污染的培養物,必須經121℃30min高壓滅菌。
    3. 染菌后的吸管,使用后放入5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中,zui少浸泡24h(消毒液體不得低于浸泡的高度)再經121℃30 min高壓滅菌。
    4. 涂片染色沖洗片的液體,一般可直接沖入下水道,烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中,經高壓滅菌后方可倒入下水道,染色的玻片放入5﹪煤酚皂溶液中浸泡24 h后,煮沸洗滌。做凝集試驗用的玻片或平皿,必須高壓滅菌后洗滌。
    5. 打碎的培養物,立即用5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液噴灑和浸泡被污染部位,浸泡半小時后再擦拭干凈。
    污染的工作服或進行烈性試驗所穿的工作服、帽、口罩等,應放入消毒袋內,經高壓滅菌后方能洗滌。
 
    五、培養基制備要求
    培養基制備的質量將直接影響微生物生長。因為各種微生物對其營養要求不*相同,培養目的的不同,各種培養基制備要求如下:
    1.根據培養基配方的成分按量稱取,然后溶于蒸餾水中,在使用前對應用的試劑藥品應進行質量檢驗。
    2.PH測定及調節:PH測定要在培養基冷至室溫時進行,因在熱或冷的情況下,其PH有一定差異,當測定好時,按計算量加入堿或酸混勻后,應再測試一次。培養基PH值一定要準確,否則會影響微生物的生長或影響結果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養基的PH降低或升高,故不宜滅菌壓力過高或次數太多,以免影響培養基的質量,指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調完PH后再加入。
    3.培養基需保持澄清,便于觀察細菌的生長情況,培養基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,必要時可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質而影響透明度。
    4.盛裝培養基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質玻璃容器為好。
    5.培養基的滅菌既要達到*滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營養價值,一般121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質的培養基如糖類、血清、明膠等,則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等,待基礎瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。
    6.每批培養基制備好后,應做無菌生長試驗及所檢菌株生長試驗。如果是生化培養基,使用標準菌株接種培養,觀察生化反應結果,應呈正常反應,培養基不應貯存過久,必要時可置4℃冰箱存放。
    7.目前各種干燥培養基較多,每批需用標準菌株進行生長試驗或生化反應觀察,各種培養基用相應菌株生長試驗良好后方可應用,新購進的或存放過久的干燥培養基,在配制時也應測PH,使用時需根據產品說明書用量和方法進行。
    8.每批制備的培養基所用化學試劑、滅菌情況及菌株生長試驗結果、制作人員等應做好記錄,以備查詢。
 
    六、樣品采集及處理要求
    1.所采集的檢驗樣品一定要具有代表性,采樣時應首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環境衛生狀況等進行詳細調查,檢查是否有污染源存在。
    2.根據食品的種類及數量,采樣數量及方法應按標準檢驗方法的要求進行。
    3.采樣應注意無菌操作,容器必須滅菌,避免環境中微生物污染,容器不得使用煤酚皂溶液,用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌,更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物,以避免殺死樣品中的微生物,所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應用。
    4.樣品采集后應立即送往檢驗室進行檢驗,送檢過程中一般不超過3h,如路程較遠,可保存在1~5℃環境中,如需冷凍者,則在凍存狀態下送檢。
    5.檢驗室收到樣品后,進行登記(樣品名稱、送檢單位、數量、日期、編號等),觀察樣品的外觀,如果發現有下列情況之一者,可拒絕檢驗。
    (1) 樣品經過特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者,失去代表原食品檢驗意義者。
    (2) 瓶、袋裝食品已啟開者,熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者,即失去原食品形狀者(食物中毒樣品除外)。
    (3) 按規定采樣數量不足者。
    對送檢符合要求的樣品,檢驗室收到后,應立即進行檢驗,如果條件不具備,應置4℃冰箱存放,及時準備創造條件,然后進行檢驗。
    6.樣品檢驗時,根據其不同性狀,進行適當處理。
    (1) 液體樣品接種時,應充分混合均勻,按量吸取進行接種。
    (2) 固體樣品,用滅菌刀、剪取其不同部位共25g,置于225ml滅菌生理鹽水或其他溶液中,用均質器攪碎混勻后,按量吸取接種。
    (3) 瓶、袋裝食品應用滅菌操作啟開,根據性狀選擇上述方法處理后接種。
 
    七、樣品檢驗、記錄和報告的要求
    1.檢驗室收到樣品后,首*行外觀檢驗,及時按照國家標準檢驗方法進行檢驗,檢驗過程中要認真、負責、嚴格進行無菌操作,避免環境中微生物污染。
    2.樣品檢驗過程中所用方法、出現的現象和結果等均要用文字寫出試驗紀錄,以作為對結果分析、判定的依據,記錄要求詳細、清楚、真實、客觀、不得涂改和偽造。
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