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3T3-L(小鼠脂肪細胞)

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所  在  地上海市

更新時間:2016-03-30 17:15:28瀏覽次數:318次

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3T3-L(小鼠脂肪細胞) 具體操作
取出凍存管: 根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。
初學者易犯錯誤:水浴鍋未預熱或者未預熱到37
水浴鍋內凍存管太多,導致傳熱不佳,使融化時間延長。
離心前忘記平衡,導致離心機損壞和細胞丟失。
一次復蘇細胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導致細胞交叉污染。
實驗前準備:將水浴鍋預熱至37
3T3-L(小鼠脂肪細胞)75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶 等。
迅速解凍:

迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.-2min

凍存管內液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min
制備細胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內加入0ml培養液,吹打制成細胞懸液。
活化與細胞復蘇    收到細胞株包裹時, 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養, 或立即冷凍保存置于70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)
 細胞復蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96液氮中的細胞快速融化至37,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。
細胞計數:細胞濃度以5×05/ml為宜。
培養細胞將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養瓶內,將培養瓶放入375CO2的培養箱內2-4小時或者24-48小時后換液繼續培養培養,換液的時間由細胞情況而定。
公司其他銷量大產品信息:3080 無菌7.5%氯化鈉肉湯 5ml× 瓶/箱 用于金黃色葡萄球菌的均質增菌
30805 無菌腦心浸出液肉湯(BHI) 5ml×0 支/盒 用于細菌的培養
3080 0%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯 5ml× 瓶/箱 金黃色葡萄球菌均質增菌
300 動力‐硝酸鹽培養基(A 法) 0ml×0 支/盒 用于細菌的動力試驗
0403 西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂斜面 5ml×0 支/盒 細菌檸檬酸鹽利用試驗
370 綠膿菌素測定用培養基(PDP)斜面 0 支/盒 用于綠膿菌素測定
30 無菌4‐甲基傘形酮葡糖苷酸(MUG)培養基5ml×0 支/盒 用于大腸埃希氏菌檢驗
30309 無菌四硫磺酸鈉亮綠培養基(TTB) 0ml×0 支/盒 用于沙門氏菌選擇性增菌GB 4789.—00 菌落總數測定
00 平板計數瓊脂(PCA) 50g/瓶 用于細菌總數測定
300 平板計數瓊脂平板(PCA) 90mm×0 個/包 用于細菌總數測定
00 磷酸鹽緩沖液(pH7.) 50g/瓶 用于樣品稀釋
300 無菌磷酸鹽緩沖液(pH7.) 5ml× 瓶/箱 用于樣品稀釋
3003 無菌磷酸鹽緩沖液(pH7.) 9ml×0 支/盒 用于樣品稀釋
3004 無菌生理鹽水 5ml× 瓶/箱 用于樣品稀釋
3005 無菌生理鹽水 9ml×0 支/盒 用于樣品稀釋GB 4789.3—00 大腸菌群計數

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