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上海博研:大鼠干細胞因子(SCF)

閱讀:477發(fā)布時間:2013-01-06

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大鼠干細胞因子(SCF)標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP )活性。
大鼠干細胞因子(SCF)操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
160ng/L 5 號標準品 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液
80ng/L 4 號標準品 150µl 的5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
40ng/L 3 號標準品 150µl 的4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
20ng/L 2 號標準品 150µl 的3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
10ng/L 1 號標準品 150µl 的2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液


2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,


然后再加待測樣品 10 µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50µl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進行。

大鼠干細胞因子(SCF)相關(guān)產(chǎn)品:

BYS11917B 大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒
BYS11918B 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒
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BYS11927B 大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒
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BYS11935B 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒
BYS11936B 大鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒


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