北京諾博萊德科技有限公司供應(yīng)SDS裂解液 NobleRyder P0912；現(xiàn)貨供應(yīng)SDS裂解液 NobleRyder 量大優(yōu)惠，咨詢 ： 1215878164
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品包裝 | 產(chǎn)品價(jià)格 |
P0912 | SDS裂解液 | 100ml | 220.00元 |
我們生產(chǎn)的SDS裂解液(SDS Lysis Buffer)是一種比較強(qiáng)烈的細(xì)胞組織裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、ChIP(染色質(zhì)免疫共沉淀，chromatin immunoprecipitation)等。
關(guān)于我們生產(chǎn)的不同的裂解液的主要特點(diǎn)和差異，以及如何選擇裂解液可參考附錄。
SDS裂解液的主要成分為50mM Tris(pH8.1)，1% SDS，以及2mM sodium pyrophosphate，25mM β-glycerophosphate，1mM EDTA，1mM Na3VO4，0.5 ug/ml leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。
用SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品，可以用我們生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測(cè)定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
P0912 | SDS裂解液 | 100ml |
| PMSF（100mM） | 1.5ml |
— | 說(shuō)明書 | 1份 |
保存條件：
-20℃保存，一年有效。
注意事項(xiàng)：
為取得*的使用效果，盡量避免過(guò)多的反復(fù)凍融。可以適當(dāng)分裝后使用。
裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。
關(guān)于裂解液的選擇，一方面可以參考我們生產(chǎn)的各種裂解液主要特點(diǎn)、差異，選擇合適的裂解液；另一方面也需要通過(guò)一些預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)摸索*的適合您實(shí)驗(yàn)條件的裂解液。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明：
對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解SDS裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1mM。
2. 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒(méi)有干擾，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成50-100萬(wàn)細(xì)胞/管，然后再裂解。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
3. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作。
裂解液用量說(shuō)明：通常6孔板每孔細(xì)胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200微升或250微升。如果用于ChIP，建議6孔板每孔細(xì)胞至少加入200微升裂解液。
對(duì)于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解SDS裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1mM。
3. 按照每20毫克組織加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
5. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過(guò)強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū)，是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)耗材及實(shí)驗(yàn)儀器研發(fā)、銷售、服務(wù)為一體的生物科技公司，公司主要經(jīng)營(yíng)的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz,Fermantas（MBI）, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等；產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)常用試劑、實(shí)驗(yàn)室常用耗材及儀器。
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