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ELISA實驗質量控制問題
點擊次數：323 發布時間：2012-10-22
ELISA實驗質量控制問題
從1949年美國College of American Pathologists（簡稱CAP）首先開始研究臨床實驗室室內質量控制（簡稱質控）問題，美國學者Levery和Jenning于1950年發表*篇關于使用質控圖的實驗室室內質控，臨床檢驗實驗室的室內質控工作正式拉序幕。
到70年代，實驗室質量控制進入一個新的階段--全面質量管理，推行GoodLaboratory Parctice（簡稱GLP）。進入80年代末期，GLP的統一標準產生了，發展到"認證實驗室"管理階段。全面質量管理的宗旨在于預防差錯的產生。質控圖的統計學質控的目的是檢出差錯。統計學的實驗室室內質控是全面質量管理中的一個重要環節。
本章節主要介紹免疫學檢驗的統計學室內質控方法。因為ELISA是目前臨床上zui常用的一種免疫學檢驗方法，就以ELISA檢驗為例，介紹一下有關問題。
衛生部臨床檢驗中心免疫質控室從1988年開始在全國范圍內開展乙肝標志物檢驗的質量評價活動，一直采用這一套質量評價方法，并在實踐中不斷實踐、提高和完善，希望能找出一條適合中國國情的，行之有效的質量管理的道路。
1 、基本概念
1.1 、質量控制（Quaility Control,Q.C）
質量控制是監視全過程，排除誤差，防止變化，維持標準化現狀的一個管理過程。這一過程是通過一個反饋環路進行的。
1）確定控制的對象；
2）規定控制對象的標準（預期值）；
3）制定或選擇控制方法和手段；
3）測量實際數據；
4）比較或較對實際數據與預期值之間的差異，并說明產生這一差異的原因。超出預
定誤差范圍，報警系發出信號，反饋通道中斷。
5）采取行動，解決差異。恢復原狀（原標準狀態）的手段發揮作用。
質量控制主要采用質控圖進行。質控圖是把某一檢驗的性能數據與所計算出來的預期的"控制限"進行比較的圖。這種性能數據是在按規程正常進行時，按時間順序而抽選出來的，其目的是檢測檢驗過程中變異的"可追查"性原因。"可追逆"性的誤差原因，是指除去隨機誤差以外的其他原因。"控制限"是通過統計計算出來的，在后我們將詳細介紹（見
3、室內質控程序）。
1.2 、誤差
實驗誤差分為三種：系統誤差、隨機誤差和過失誤差。
系統誤差是指一系列測定結果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差，有明顯的規律性，可在一定條件下重復出現，是可以通過質控預防和校正的。
隨機誤差又稱偶然誤差，是一種偶然的、未能預料到的誤差，是難以避免和校正的誤差。檢驗工作中隨機誤差的分布符合正態分布規律。
過失誤差是人為的責任誤差。通過加強實驗室管理和開展質量控制工作是可以避免的。
1.3 、正態分布及標準差
ELISA試驗中，檢驗同一樣本達20次以上時，就會發現這組數據（指測定結果的吸光值）分布在均值兩側，大部分集中在均值附近。如果以測定值為橫坐標，以出現的頻率為縱坐標作圖，就可繪出一個呈鐘形的曲線圖。如圖5-1，鐘頂處為均值，其他值以均值為中心對稱分布，這就是正態分布。
正態曲線以下的面積稱概率，常用樣本的均數（X）和標準差（SD）來表示，其計算方法如下：
均值、標準差和概率的關系如下：
X±1SD，概率0.68 X±2SD，概率0.95 X±3SD，概率0.99
換言之，當ELSIA檢測同一樣本達一定次數后所得的一組數據，其中靠近均值（X）的±1SD范圍內的數據，占該組數據的68%，在X±2SD范圍內分布的數據占總體的95%，在X±3SD范圍內分布的數據占總體的99%。當我們要求檢驗結果在X±2SD范圍內為合格時，將有95%的數據可能合格。
1.4 、真值
用確切的、的決定性方法測得的值，稱為真值。真值一般是測不到的。通過可靠的決定性方法測出的值，稱為靶值，通常用靶值來表示真值的大小。
1.5 、準確度（accuracy）
是指測定結果與真值（或靶值）接近的程度。準確度不能以數字表示，往往用不準確度來衡量。測定結果與靶值的偏離程度稱為偏差，它表示該項檢驗的不準確度。
偏差=檢驗的均值-真值（或靶值）
相對偏差=偏差真值÷（或靶值）×100%
1.6 、精密度（Precision）
是指對同一樣本重復測定時，每次測定結果與平均值的接近程度，即重復測定值之間的符合程度。
1.7、 標準品
1）標準品 由WHO或相應組織標定的，用肯定的、*的、準確的物理或化學方法測定的定值材料。
2）生物學活性標準品根據生物學反應由WHO或相應組織標定的活性單位的材料。
3）參考標準血清 國家標準化組織根據標準化生產的法定材料。可用于鑒定儀器和鑒定方法準確性。
1.8、 臨床決定性水平（clinical decision leuel）
當某個被測物的濃度達到某一水平時，臨床醫師必須采用醫療措施。被測物的這濃度稱為臨床決定性水平。