平板劃線分離法是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基表面通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養后生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。有時這種單菌落并非都由單個細胞繁殖而來的，故必須反復分離多次才可得到純種。其原理是將微生物樣品在固體培養基表面多次作“由點到線"稀釋而達到分離目的的。

如何使用平板劃線方法如下：（zanghan紅外線滅菌器）

1、利用zanghan品牌紅外線滅菌，將接種環通過接種棒伸入滅菌器腔內，滅菌5秒左右

2、在紅外線滅菌器旁冷卻，并打開棉塞

3、將試管口通過紅外線滅菌器，利用滅菌器腔外的溫度對試管口進么消毒

4、將冷卻的接種環伸入菌液中，粘取一環菌液

5、將試管口再次通過紅外線滅菌器，并迅速蓋進棉塞

6、左手將培養皿蓋打開一條縫，右手將粘有菌液的接種環伸內平版內，劃3-5條平行線，蓋上器皿，注意不要損壞培養基

7、再次對接種環進行滅菌器，待其冷卻后，從 第一區域未端劃向第二區域重復操作，在三四區域重復劃線，注意不要將最后區域的劃線跟第一區域相連，

8、將平板倒置放入培養箱中培養。