[器材和試劑]
● 用于細(xì)菌培養(yǎng)的無(wú)菌96孔圓底微量滴定板，如Nune 62162（可自VWR購(gòu)得）
● 2×TY/amp/glu培養(yǎng)基
● 含30％甘油的2×TY/amp/glu培養(yǎng)基（2×TY/amp/glu/gly）
● 2×TY/amp/kan培養(yǎng)基
● 選自鋪板培養(yǎng)或抗體文庫(kù)選擇的克隆株


[方法]
1．用無(wú)菌牙簽挑取單個(gè)克隆，分別置于每孔含100tH 2×TY/amp/glu的96孔微量滴定板 板孔中。振蕩（300r/rain）培養(yǎng)過(guò)夜，放在微量滴定板架上。
2．每孔加入50ul2×TY/amp/glu/gly并儲(chǔ)存于-70℃。
3．使用96孔無(wú)菌轉(zhuǎn)移設(shè)備或移液器，從主板每孔中吸取2ul，接種到一塊每孔含150ul 2×TY/amp/Rlu的96孔板中。37℃振蕩，直到A600值接近0．5（2．5小時(shí)）。
4．每孔加入50ul含2X109pfu/m1輔助噬菌體（在儲(chǔ)存料中稀釋）的2×TY/amp/glu。噬菌體與細(xì)菌的比例應(yīng)當(dāng)接近20：1。37℃下孵育孔板30分鐘。
5．以2700r/min離心孔板10分鐘，用多道移液器或吸取設(shè)備移除上清。
6．用150l 2×TY/amp/kan重懸每孔的細(xì)菌沉淀。 因?yàn)榭贵w表達(dá)取決于1acZ啟動(dòng)子的滲漏表達(dá)，因此這一步要去除葡萄糖。37℃振蕩（300r/min）培養(yǎng)孔板過(guò)夜。
7．次日，以2700r/min離心孔板10分鐘；每孔取50F1上清用來(lái)進(jìn)行噬菌體ELISA。