1．通過(guò)腹腔注射濃度為1．25％（w/v）的阿佛丁來(lái)麻醉小鼠，劑量為每克體重注射15ul的阿佛丁。開(kāi)始時(shí)用*注射300ul。用右手抓住一只小鼠尾部的并提起，使其后腿離地。然后用左手抓住鼠的頭和頸的后部，提起并翻轉(zhuǎn)小鼠，暴露其腹部。將其固定，盡可能使小鼠不要扭曲或翻身。用右手注射300ul麻醉劑，其將在1分鐘內(nèi)起效。如果小鼠還未被麻醉，那就再注射100ul增量的麻醉劑，直到小鼠表現(xiàn)出深度麻醉的跡象。麻醉時(shí)間應(yīng)該持續(xù)30～60分鐘。
2．將鼠尾置于溫水中，使其尾部血管擴(kuò)張。
3．用*向一根鼠尾血管注射200～500ul噬菌體懸液。所選鼠尾血管在尾部一側(cè)，并與皮膚表層非常接近。將針頭成斜角插入尾部血管，接著以正壓推動(dòng)注射器活塞，從而注射約20f11的噬菌體懸液。假如血管暫時(shí)沒(méi)有紅色血液和填充物，那就要正確地確定血管的位置。通過(guò)每次注射20/A1懸液并在每次注射后使血管再填滿的方式，緩慢注射剩余噬菌體。
4．讓噬菌體zui少循環(huán)5分鐘。
5．將小鼠背部朝下，直接用剪刀在胸腔下的腹部剪開(kāi)一個(gè)口，可以看到肝臟的下側(cè)。用剪刀的將肝臟移到旁邊，同時(shí)暴露橫隔膜。刺破隔膜并把胸腔的一側(cè)剪碎，然后橫過(guò)隔膜把相對(duì)一側(cè)的胸腔也剪碎。用*夾緊劍狀軟骨，并打開(kāi)胸腔暴露整個(gè)心臟。剪開(kāi)心臟和胸骨之間的所有連接組織。考慮到排水，zui后要在胸腔的一側(cè)沿腹背方向切開(kāi)一個(gè)口。當(dāng)正確進(jìn)行以上步驟時(shí)，所有的程序都應(yīng)該相對(duì)無(wú)血。皮膚將會(huì)少量地出血，但不應(yīng)有血液在胸腔內(nèi)積聚，也不能有任何來(lái)自心臟或其他主血管的大出血。
6，用10ml的DMEM或PBS來(lái)灌注小鼠。首先將注射器針頭插入左心室3—5mm，然后推動(dòng)活塞。若針頭位置已經(jīng)正確，那么你將看到心臟左側(cè)會(huì)失色并輕微膨脹。接著用左手拿剪刀剪開(kāi)右心房，開(kāi)始用DMEM或PBS勻速灌注，以保持心臟膨脹并仍然跳動(dòng)的速率，大約2ml/min。