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上海金穗生物科技有限公司

光鏡免疫金銀組織化學原理

時間:2012-10-13閱讀:710
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  免疫金銀染色(immunogold silver staining;IGSS)的基本原理是通過免疫反應沉積在抗原位置的膠體金顆粒起著一種催化劑作用,用對苯二酚還原劑將銀離子(Ag+)還原成銀原子(Ag),被還原的銀原子圍繞金顆粒形成一個“銀殼”,“銀殼”一旦形成本身亦具有催化作用,從而使更多銀離子還原并促使“銀殼”越長越大,zui終使抗原位置得到清楚放大。

 
用銀增敏示意圖
 
    該方法只有在抗原存在的情況下,才有金顆粒并促使銀殼的形成。沒有抗原區域就沒有抗原—抗體反應,也就不會有顆粒存在,銀離子與對苯二酚的反應則很慢,這樣光鏡下就能看到抗原—抗體反應部位呈黑色或黑褐色。IGSS方法可提高抗原—抗體反應部位金顆粒的可見度,它是一種簡便、特異而敏感的方法。
 
    IGSS可分直接法、間接法和搭橋法。
免疫金銀染色間接法                   免疫金銀染色搭橋法
Ag-抗原;Ab-特異抗體;Gab-金標記抗體  Ag-抗原;Abl-特異性一抗;Ab2-橋聯抗體
         GP-金粒;SP-銀沉淀           Ab3-G-金標抗體;GP-金顆粒;SP-銀沉淀

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