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上海萬安生物科技有限公司
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閱讀：970發布時間：2015-4-7
人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)免疫組化試劑盒
【規格】：50T 100T
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人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)免疫組化試劑盒
【實驗原理】該試劑盒以HRP 標記的鏈霉親和素復合物（HRP Streptavidin Conjugate，
HRP-SA）為基礎，可用于檢測細胞、組織內的特異性抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、定性定位準確、背景清晰。在所用的一抗與相應靶抗原結合后，用生物化二抗與一抗特異性結合，zui后加入HRP-SA，形成抗原—特異一抗—*化二抗—HRP-SA 復合物，顯微鏡下觀察成像。
【試劑盒所含試劑】
試劑A 通透液：0.1% Triton-X 100 10ml（選用）
試劑B 封閉緩沖液（封閉用） 20 mL
試劑C （*分裝）已稀釋的即用型一抗（2.5ml）
試劑D （*分裝）*化羊抗兔IgG 1 支
（濃度1.5 mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50 μL+抗體稀釋液20ml
試劑E HRP-SA 復合物1 支（濃度1 μM，稀釋比1:50~1:200）100 μL
試劑F DAB 顯色液 5ml
人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)免疫組化試劑盒
【注意事項】
1. 修復后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導致結晶或抗原封閉。
2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復使用。
3. 若試劑為微量濃縮液，用前應低速離心，將內蓋和管壁附著的溶液離到底部。
4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween 20，否則會影響結果觀察。
5. 如須復染細胞核，則在封片前復染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封片。
【抗原修復方法】
常用抗原修復液：檸檬酸緩沖液（0.01M pH6.0）、EDTA 抗原修復液（pH8.0 或
9.0）等等。
一、酶消化修復法
切片脫蠟水化處理，TBS 沖洗，在組織上滴加*或*，37℃孵育
20~30min 后TBS 沖洗即可。
二、微波抗原修復法
微波盒中加入抗原修復液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料
切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續微波10~15min，取出微波
盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，
須自行調整。
三、直接高壓抗原修復法
取修復液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復
液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min 即可脫離熱源，自
然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。
四、隔水式高壓抗原修復法
不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復液于微波爐中加熱至沸
騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時
4~8 min 即可關閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用
于較難檢測或核抗原的修復。
【保存】：2-8℃
【保質期】：6個月
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