熒光素標(biāo)記組織型纖溶酶原激活劑抗體IgG，Anti-t-PA/FITC

免疫組化染色步驟：
（以美國ZYMED公司SP試劑盒為例）
1）石蠟切片脫蠟至水。
2）3%H2O2室溫孵育5~10分鐘，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。
3） 蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘，（如需采用抗原修復(fù)，可在此步后進(jìn)行）。
4） 5~10％正常山羊血清（PBS稀釋）封閉，室溫孵育10分鐘。傾去血清，勿洗，滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗或一抗工作液，37℃孵育1~2小時或4℃過夜。
5）PBS沖洗，5分鐘×3次。
6）滴加適當(dāng)比例稀釋的*標(biāo)記二抗（1%BSA-PBS稀釋），37℃孵育10~30分鐘；或滴加第二代*標(biāo)記二抗工作液，37℃或室溫孵育10~30分鐘。
7）PBS沖洗，5分鐘×3次。
8）滴加適當(dāng)比例稀釋的辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素（PBS稀釋），37℃孵育10~30分鐘；或第二代辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液，37℃或室溫孵育10~30分鐘。
9） PBS沖洗，5分鐘×3次。
10） 顯色劑顯色（DAB或AEC）。
11）自來水充分沖洗，復(fù)染，封片。
冰凍切片免疫組化染色步驟
m，室溫放置30分鐘后，入4℃丙酮固定10分鐘，PBS洗，5分鐘×3。用3％過氧化氫孵育5~10分鐘，消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS洗，5分鐘×2。m冰凍切片4~