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208次純化抗體法---免疫吸收法
例如抗IgA血清的純化方法---免疫吸收法。如分泌型IgA( SIgA)抗原純度不高,所制的抗血清常與IgG呈交叉反應,為此需要吸收,常采用純化的人IgG戊二醛聚合物加以吸收純化。方法如下:
1.人IgG聚合物的制備 在5ml含40mg/ml人IgG的0.1mol/L pH7.0磷酸緩沖溶液中,加入2.5%戊二醛溶液1ml,邊加邊攪,5min即出現混濁,逐現大塊膠塊,放置30min后,用研缽將凝膠磨細,繼用1.0mol/L pH7.0磷酸緩沖溶液反復洗滌3次,末次加蒸餾水至20ml,即為人IgG聚合物懸液。
2.免疫吸收法 將待吸收的抗SIgG血清加入待量IgG聚合物懸液,置室溫攪拌60min,離心沉淀,上清液即稀釋1倍的純化抗SIgA血清。如用IgG聚合物作少量分次吸收,其效果更好。
伊文氏藍(Evans blue)襯染法
用0.01%伊文氏藍的0.01mol/L pH7.2PBS稀釋熒光抗體,可將背景細胞和組織染色,呈紅色熒光,與特異性黃綠色熒光形成鮮明的對比,減少了非特異性熒光,宜作常規應用。伊文氏藍一般先配成1%溶液,保存于4℃,用前再稀釋至0.01%用以
和然釋熒光抗體。
此外,還可以用*消化組織切片或用10%牛血清蛋白封閉法等消除非特異性染色,提高特異性染色。
Anti-VSIG4 /FITC 熒光素標記T淋巴細胞負調節蛋白之一抗體IgG |
Anti-VSV-G tag/FITC 熒光素標記VSV-G tag標簽抗體IgG |
Anti-VSV-G tag/HRP 辣根過氧化物酶標記VSV-G tag標簽抗體IgG |
Anti-VTG/FITC 熒光素標記卵黃蛋白原抗體IgG |
Anti-VTN/FITC 熒光素標記玻璃粘連蛋白抗體IgG |
Anti-VWCE/URG11/FITC 熒光素標記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgG |
Anti-VWF/FITC 熒光素標記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgG |
Anti-WDR26 /Gold 膠體金離子標記Gβ類似蛋白WDR26抗體IgG |
Anti-WDR26/FITC 熒光素標記Gβ類似蛋白WDR26抗體IgG |
Anti-WEE1 protein/FITC 熒光素標記WEE1蛋白抗體IgG |
Anti-Wnt1/FITC 熒光素標記信號通路Wnt1抗體IgG |
Anti-Wnt2B/FITC 熒光素標記信號通路Wnt2B抗體IgG |
Anti-Wnt3a/FITC 熒光素標記信號通路Wnt3a抗體IgG |
Anti-WNT/FITC 熒光素標記信號通路Wnt抗體IgG |
Anti-WNT9A/WNT14/FITC 熒光素標記信號通路Wnt9a抗體IgG |
Anti-WNT10A/FITC 熒光素標記信號通路WNT10A抗體IgG |
Anti-WRCH-1/FITC 熒光素標記WRCH1抗體IgG |
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