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蘇州艾瑞德生物科技有限公司
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預包被偶聯抗原,樣本中的殘留物*藥物將和微孔條上預包被的偶聯抗原競爭*藥物抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物*藥物的含量成負相關,與標準曲線比較可得出相應殘留物*藥物的含量。
【試劑盒技術指標】
規 格:96孔/盒
靈 敏 度:高靈敏度(0.05ppb),低檢測限(2.5ppb蜂蜜樣品)
檢測時間: 75min
樣本檢測下限:
蜂蜜…………………………………………………2.5ppb
肉類 ………………………………………………10ppb
牛奶 ………………………………………………10ppb
奶粉………………………………………………45ppb
血清………………………………………………2ppb
尿樣………………………………………………2ppb
交叉反應率:
* ……………………………………………*
樣本回收率:
*試劑盒……………………………… 80%±20%
【試劑盒組成】
1、 微量測試孔:1×96孔板(12條×8孔)
2、 標準溶液X6瓶:(1ml/瓶)0ppb、0.5ppb、1.5ppb、4.5ppb、13.5ppb、40.5ppb
3、 酶標記物 12ml
4、 抗體工作液 7ml
5、 底物A液 7ml
6、 底物B液 7ml
7、 終 止 液 7ml
8、 20X濃縮洗滌液40 ml
9、 5X 濃縮復溶液 50ml
【結果判定】
結果判定有兩種方法,粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注意樣本吸光值與其所含*的含量成負相關。
1、粗略判定:
用樣本的平均吸光度值與標準值比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設樣本1 的吸光度值為0.3,樣本2 的吸光度值為1.0,標準液吸光度值分別是:
0ppb 為2.243; 0.05ppb 為1.816;0.15ppb 為1.415;0.45ppb 為0.74;1 .35ppb 為0.313;4 .05ppb 為0.155。則樣本1 的濃度范圍是1.35ppb~4.05ppb;樣本2的濃度范圍是0.15ppb~0.45ppb,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中*實際濃度。
1、定量分析:
所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以*個標準(0標準)的吸光度值(B0)再乘以*,即百分吸光度值。
百分吸光度值(%)= B ×*
B—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0ng/ml標準溶液的平均吸光度值
以標準品百分吸光率為縱坐標,以*標準品濃度(ng/ml)的半對數為橫坐標,繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中*實際濃度。
若利用試劑盒專業分析軟件進行計算,更便于大量樣品的準確、快速分析。
3、標準曲線:
B/B0 (%)
0.05 0.15 0.45 1.35 4.05
*(ppb) [µg/kg]
圖1:*檢測試劑盒的回歸曲線
4、再現性:
%CV
*(ppb) [µg/kg]
圖2:*檢測試劑盒的精密度
由多個不同的實驗結果確定了精密度,圖2顯示出*檢測試劑盒的精密度情況,獲得的標準吸收值的變異系數(%CV)對相應*濃度作曲線,可以看到在全部范圍內變異系數如此之低,可以得到很好的再現性。
【注意事項】
1、 使用前將所有試劑溫度回升至室溫20-25℃。試劑及標本沒有回到室溫(20-25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2、 在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會伴隨著出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3、 混合要均勻,否則會出現重復性不好的現象。
4、 反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、 不要使用過了有效日期的試劑盒,稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號的盒中試劑。
6、 不用的微孔板放進自封袋密封;標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、 顯色液若有任何顏色表明變質,應當棄之。0標準的吸光度值小于0.5個單位(A450nm<0.5 )時,表示試劑可能變質。
8、 該試劑盒*反應溫度為37℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
【儲存】
原包裝應儲存于2~8℃保鮮冷藏,切勿冷凍。
【有效期】
有效期12個月;生產日期、有效期、生產批號見外包裝。
提醒:
*6個標準品——(0;0.5;1.5,4.5,13.5,40.5,)為10倍濃縮;使用時候請按照說明書稀釋為1倍(0;0.05;0.15;0.45;1.35;4.05)現配現用。
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