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蘇州艾瑞德生物科技有限公司
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預包被偶聯抗原,樣本中的殘留物*、*、*、磺胺甲基嘧啶、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、*、*、*、*、*、磺胺喹噁啉、*、*、磺胺苯酰與微孔條上預包被的偶聯抗原競爭抗磺胺的抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含磺胺類藥物的含量成負相關,與標準
【試劑盒技術指標】
規 格:96孔/盒
靈 敏 度: 0.4ppb
檢測時間: 80min
樣本檢測下限:
組 織 (高檢測限方法)………………………………0.4ppb
組 織 (低檢測限方法)……………………………… 2ppb
蜂 蜜…………………………………………………0.4ppb
血 清 、 尿 液 ……………………………………… 1.6 ppb
牛 奶………………………………………………… 8ppb
樣本回收率:
組 織 、 蜂 蜜 …………………………………… 85% ±25%
尿樣、牛奶、血清……………………………… 70% ±20%
反 應 交 叉 率 :
*(SD或SDZ)………………………………100.0%
*/磺胺六甲氧嘧啶(SMM)……………97.6%
*(SMZ)……………………………………*
磺胺甲基嘧啶(SM1 )……………………………… 92%
酞酰磺噻唑(PST)…………………………………73%
磺胺甲噻二唑……………………………………… 110%
磺胺對甲氧嘧 啶 (SMD)……………………………… 66%
*(SIZ) …………………………………… 95%
*(SM2) ……………………………… 140%
*(SDM) ……………………………110%
*(SDM2)……………………………………… 80%
磺胺喹噁啉(SQX)……………………………………160%
*(SMP)………………………………… 80%
*(SPDZ)…………………………………… 75%
磺胺苯酰(SML)……………………………………… 104%
由反應交叉率可以得出:該試劑盒可用于磺胺多種殘留物的檢測,*國家磺胺類多殘留種類檢測的要求。
【試劑盒組成】
1. 微量測試孔:每條8孔,一板12條
2. 標 準 液×6瓶:(1ml/瓶) 0ppb、 0.4ppb、1.2ppb、 3.6ppb、10.8ppb、32.4ppb
3. 酶標記物 7ml ………………………… 紅色帽
4. 抗體工作液 10ml ……………………… 藍色帽
5. 底物A液 7ml …………………………白色帽
6. 底物B液 7 ml …………………………黑色帽
7. 終止液 7 ml …..…………………… 黃色帽
8. 20X濃縮洗滌液40 ml ………………… 白色帽
9. 2X濃縮復溶液 50 ml ………………… 透明帽
【結果判定】
結果判定有兩種方法,粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注意樣本吸光值與磺胺類藥物的含量成負相關。
1、 粗略判定
用樣本的平均吸光度值與標準值比較即可得出其濃度范圍(ng /ml)。假設樣本1的吸光度值為0.211,樣本2的吸光度值為0.785,標準液吸光度值分別是:0ppb為2.140;0.4ppb為1.560;1.2ppb為1.124;3.6ppb為0.650; 10.8ppb為0.328;32.4ppb為0.125。則樣本1的濃度范圍是10.8ppb-32.4ppb;樣本2的濃度范圍是1.2ppb-3.6ppb。乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中磺胺類藥物實際含量。
2、 定量分析
(1)百分吸光率的計算,標準品或樣本的百分吸光率等于標準品或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個標準(0標準)的吸光度值,再乘以*,即:
百分吸光度值(%) = B ×*
B—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0ng/ml標準溶液的平均吸光度值
(2)標準曲線的繪制與計算
以標準品百分吸光率為縱坐標,以磺胺類藥物濃度(ng /ml)的半對數為橫坐標,繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中磺胺類藥物實際含量。
若利用試劑盒專業分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、快速分析。(索取)
3、標準曲線:
B/B0 (%)
0.4 1.2 3.6 10.8 32.4
(ppb) [µg/kg]
圖1:磺胺類藥物檢測試劑盒的回歸曲線
4、再現性:
%CV
(ppb) [µg/kg]
圖2:磺胺類藥物檢測試劑盒的精密度
由多個不同的實驗結果確定了精密度,圖2顯示出磺胺類藥檢測試劑盒的精密度情況,獲得的標準吸收值的變異系數(%CV)對相應磺胺類藥濃度作曲線,可以看到在全部范圍內變異系數如此之低,可以得到很好的再現性。
【注意事項】
1、 使用前將所有試劑溫度回升至室溫20-25℃。試劑及標本沒有回到室溫(20-25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2、 在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會伴隨著出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3、 混合要均勻,否則會出現重復性不好的現象。
4、 反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、 不要使用過了有效日期的試劑盒,稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號的盒中試劑。
6、 不用的微孔板放進自封袋密封;標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、 顯色液若有任何顏色表明變質,應當棄之。0標準的吸光度值小于0.5個單位(A450nm<0.5 )時,表示試劑可能變質。
8、 該試劑盒*反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
【儲存】
原包裝應儲存于2~8℃保鮮冷藏,切勿冷凍。
【有效期】
有效期12個月;生產日期、有效期、生產批號見外包裝。
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