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三聚氰胺ELISA試劑盒

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產品型號CFC013D

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廠商性質生產商

所在地蘇州市

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更新時間：2018-03-03 10:35:01瀏覽次數：294次

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司

經營模式：生產廠家

商鋪產品：66條

所在地區：江蘇蘇州市

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產品簡介

歡迎訪問公司：http://www.ardbio.cn 蘇州艾瑞德生物科技有限公司是一家*的生物科研產品與合同供應商，是國內專注于食品安全檢測、動物疫病檢測以及相關領域的高科技生產型企業。*以來，產品質量穩定*，并與國內的檢驗檢疫管理部門及*科研院所等機構密切合作，研究開發*的檢測技術及產品。可面對大型檢驗檢測機構和企業自有實驗室提供全系列產品和有效的。

詳細介紹

一、原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預包被偶聯抗原，樣本中的三聚氰胺和微孔條上預包被的偶聯抗原競爭三聚氰胺抗體，加入酶標記物后，用底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物三聚氰胺的含量成負相關，與標準曲線比較可得出相應三聚氰胺的含量。

二、試劑盒檢測限
試劑盒檢測限：         10 ng/mL

三、試劑盒組成
1．預包被板：96T
2．標準品液：(1mL/瓶) 0 ng/mL、20 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL
3．酶標記物          12 mL
4．抗體工作液         7 mL
5．底物緩沖液         7 mL
6．底物液             7 mL
7．終止液             7 mL
8．20倍濃縮洗滌液    50 mL

四、樣本處理
配制樣品稀釋液：
稱取89.5 g Na2HPO4·12H2O ，蒸餾水定容至1000 mL。

濕的寵物食品萃取方法(稀釋100倍)
1．勻質樣品到布丁狀；
2．稱取2 g樣品加入10 mL 60%甲醇水溶液，并劇烈振蕩；
3．超聲萃取1 min，漩渦混合1 min，然后靜止5 min，使樣品分層；
4．5000 r/min室溫離心5 min，用玻璃纖維濾紙過濾上清液，并將其收集于干凈試管中；
5．用樣品稀釋液將濾液20倍稀釋；
6．取50 μL進行實驗。

干的寵物食品萃取方法(稀釋200倍)
1．均質干的寵物飼料樣品；
2．稱取1 g樣品加入10 mL 60%甲醇水溶液，并劇烈振蕩；
3．超聲萃取1 min，漩渦混合1 min，然后靜止5 min，使樣品分層；
4．5000 r/min室溫離心5 min，用玻璃纖維濾紙過濾上清液，并將萃取液收集于干凈試管中；
6．用樣品稀釋液將濾液20倍稀釋；
7．取50 μL進行實驗。

液態奶/乳飲料(稀釋5倍)
1．準確吸取1 mL液態奶或乳飲料于干凈離心管中，冷藏至4℃備用；
2．將1 mL液態奶或乳飲料樣品置于離心機中，5000 g離心10 min(建議10℃低溫離心)，分離樣品中脂肪；
3．棄上層脂肪，取0.2 mL離心后的脫脂液態奶或乳飲料試樣于干凈試管中；
4．加入0.8 mL樣品稀釋液于離心后的脫脂液態奶或乳飲料中，振蕩混勻樣品，取50 μL進行實驗。
奶粉(稀釋25倍)
1．稱取1 g奶粉樣品于干凈試管中；
2．加入5 mL的45～50℃溫水溶解奶粉并混勻后冷藏至4℃備用；
3．取1 mL溶解好的奶粉試樣于離心管中，5000 g離心10 min(建議10℃低溫離心)，棄上層脂肪，取0.2 mL試樣于干凈試管中；
4．加入0.8 mL樣品稀釋液于試管中，振蕩混勻取50 μL進行實驗。
酸奶：(稀釋5倍)
1．準確吸取1 mL液態奶或乳飲料于干凈離心管中，將PH值調至6～8，冷藏至4℃備用；
2．將1 mL樣品置于離心機中，5000 g離心10 min(建議10℃低溫離心)，棄上層脂肪，取0.2 mL試樣于干凈試管中；
3．加入0.8 mL樣品稀釋液于試管中，振蕩混勻取50 μL進行實驗。
初乳樣品：(稀釋1倍)
直接法：將樣品4℃冷藏30 min后，4000 r/min離心15 min，棄去上層脂肪，取50 μL進行實驗。

五、操作步驟
1．將試劑盒從冷藏環境中取出，置于室溫(20～26℃)下平衡30min以上，將需用的板條放入支架，按順序編號；
2．洗液配制：將50 mL濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水稀釋至1000 mL備用(或按需量稀釋)；
3．在標準品孔中加入50 μL標準品，樣品孔加入50 μL待測樣品，然后每孔加入50 μL抗體(加入標品和樣品時無時間差的影響)，輕拍混勻，37℃下孵育40 min；
4．倒出孔中的液體，用洗板機洗滌4～6遍；沒有洗板機的用戶可用300 μL洗液充入各孔中，靜置20 s，倒出孔中的液體，將微孔架倒置，在吸水紙上連續拍打3次以上，以保證*除去孔中的液體，重復操作4～6遍；
5．加入酶標記物100 μL，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃ 環境中反應20 min，取出重復洗板步驟；
6．顯色：每孔加入底物緩沖液50 μL，再加底物液50 μL，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后，置37℃ 環境中反應10 min；
7．測定：每孔加入終止液50 μL，輕輕振蕩混勻．設定酶標儀于450 nm處，測定每孔OD 值，根據標準曲線計算樣品濃度。

六、結果判定
以標準品百分吸光率為縱坐標，以三聚氰胺標準品濃度(ng/mL)的半對數為橫坐標，繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中，從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度，乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中三聚氰胺實際濃度。

七、注意事項
1．試劑及樣本沒有回到室溫(20～26℃)會導致所有標準的OD值偏低；
2．洗板拍干后應立即進行下一步操作；
3．混合要均勻，洗板要*，否則會出現重復性不好的現象；
4．反應終止液為2 mol/L ，避免接觸皮膚。
5．將不用的微孔板放進自封袋重新密封；標準物質和無色的發色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下；
6．不要使用過了有效日期的試劑盒，不要使用不同批號試劑盒中的試劑；
7．顯色液若有任何顏色表明變質，應當棄之，0濃度標準品的吸光度值小于0.6時，表示試劑可能變質；
8．該試劑盒*反應溫度為37 ℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。

八、儲藏條件和保質期
儲藏條件：試劑盒于2～8℃保存，不要冷凍。
保質期：該產品有效期為1年，生產日期見包裝盒。