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蘇丹紅ELISA試劑盒

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產品型號CFC015D

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廠商性質生產商

所在地蘇州市

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更新時間：2018-04-16 04:19:50瀏覽次數：147次

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司

經營模式：生產廠家

商鋪產品：66條

所在地區：江蘇蘇州市

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產品簡介

歡迎訪問公司：http://www.ardbio.cn 蘇州艾瑞德生物科技有限公司是一家*的生物科研產品與合同供應商，是國內專注于食品安全檢測、動物疫病檢測以及相關領域的高科技生產型企業。*以來，產品質量穩定*，并與國內的檢驗檢疫管理部門及*科研院所等機構密切合作，研究開發*的檢測技術及產品。可面對大型檢驗檢測機構和企業自有實驗室提供全系列產品和有效的。

詳細介紹

一、原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預包被偶聯抗原，樣本中的蘇丹紅和微孔條上預包被的偶聯抗原競爭蘇丹紅抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物蘇丹紅的含量成負相關，與標準曲線比較可得出相應蘇丹紅的含量。

二、試劑盒技術指標
試劑盒靈敏度：         0.4ppb
樣本定量檢測下限
水基質(番茄醬、壇壇鄉)   0.4ppb
油基質(辣椒油，辣椒醬)   0.4ppb
粉末狀(辣椒粉)          1.0ppb
交叉反應率
蘇丹1號 ……………………………………………… *
蘇丹2號 ……………………………………………… ＜1%
蘇丹4號 ……………………………………………… ＜1%
對位紅 ………………………………………………… 120%
樣本回收率
水基質 ……………………………………………… 75±10%
油基質 ……………………………………………… 50±10%
粉末狀 ……………………………………………… 65±10%

三、試劑盒組成
1、微量測試孔：96T
2、標準品液：(1ml/瓶) 0ppb、0.4ppb、3.2ppb、6.4ppb、12.8ppb、25.6ppb
3、酶標記物          12ml
4、抗體工作液        7ml
5、底物緩沖液破      7ml
6、底物液            7ml
7、終止液            7ml
8、 20倍濃縮洗滌液   50ml
9、1mg/ml標準品液：(0.2ml)

四、樣本處理
取1g樣品(辣椒面、辣椒油、辣椒醬、番茄醬)，加入3 mL丙酮溶液，超聲震蕩20 min，渦旋混合0.5 min，靜置10 min， 3000 r/min離心分離10 min，取上清100 μL用PBST稀釋10倍至1 mL，取50 μL進行ELISA測定。

五、操作步驟
1. 將試劑盒從冷藏環境中取出，置于室溫(20～26℃)下平衡30min以上，將需用的條板固定于支架，按順序編號；
2. 洗液配制：將50 mL濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水稀釋至1000 mL備用。(或按需量稀釋)
3. 標準品的配制：先將試劑盒中的1 mg/mL蘇丹紅標準品用洗液稀釋1000倍，變成1000 ng/mL，再用洗液將1000 ng/mL的標準品分別稀釋成0.4 ng/mL， 3.2 ng/mL，6.4 ng/mL，12.8 ng/mL，25.6 ng/mL。(現配現用)
4. 在標準品孔中加入50 μL標準品，樣品孔加入50 μL待測樣品，然后每孔加入50 μL抗體(加入標品和樣品時無時間差的影響)，輕拍混勻，37℃下孵育30min；
5. 倒出孔中的液體，以試劑盒濃縮洗液稀釋20倍后作為洗液，用洗板機洗滌4～6遍；沒有洗板機的用戶可用300 μL洗液充入各孔中，靜置20 s，倒出孔中的液體，將微孔架倒置，在吸水紙上連續拍打3次以上，以保證*除去孔中的液體，重復操作4～6遍；
6. 每孔加入酶標記物100 μL，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃ 環境中反應20 min ，取出重復洗板步驟。
7. 顯色：每孔加入底物緩沖液50 μL，再加底物液50 μL．輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后，置37℃ 環境中反應10 min。
8. 測定：每孔加入終止液50 μL，輕輕振蕩混勻．設定酶標儀于450 nm處(建議用雙波長450/630 nm 檢測，在20 min內讀完數據)，測定每孔OD 值，根據標準曲線計算樣品濃度。

標準樣品配制方法：
(1)準備5個1 mL瓶子，其中一個加入1000 μL洗液，一個加入700 μL洗液，其余的分別加入500 μL洗液。
(2)在1000 μL洗液瓶子中先吸出25.6 μL的洗液，然后加入25.6 μL的1000 ng/mL標準品，混勻，使其濃度為25.6 ng/mL，作好記號；
(3)再從25.6 ng/mL的瓶子中吸出500 μL加入其中一個500 μL洗液的瓶子中，使其濃度為12.8 ng/mL，混勻，作好記號；
(4)再從12.8 ng/mL的瓶子中吸出500 μL加入其中一個500 μL洗液的瓶子中，使其濃度為6.4 ng/mL，混勻，作好記號；
(5)再從6.4 ng/mL的瓶子中吸出500 μL加入其中一個500 μL洗液的瓶子中，使其濃度為3.2 ng/mL，混勻，作好記號；
(6)再從3.2 ng/mL的瓶子中吸出100 μL加入其中一個700 μL洗液的瓶子中，使其濃度為0.4 ng/mL，混勻，作好記號。 (加樣前應將標準品充分混勻，配好后在半小時內使用)

七、結果判定
以標準品百分吸光率為縱坐標，以蘇丹紅標準品濃度(ng/ml)的半對數為橫坐標，繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中，從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度，乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中蘇丹紅實際濃度。

八、注意事項
1．室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20-25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2．洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3．混合要均勻，洗板要*，否則會出現重復性不好的現象。
4．反應終止液為2M ，避免接觸皮膚。
5．將不用的微孔板放進自封袋重新密封; 標準物質和無色的發色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
6．不要使用過了有效日期的試劑盒，不要使用不同批號試劑盒中的試劑。
7．顯色液若有任何顏色表明變質，應當棄之，0標準的吸光度值小于0.6時，表示試劑可能變質。
8．該試劑盒*反應溫度為25 ℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。

九、儲藏條件和保質期
儲藏條件：試劑盒于2-8℃保存，不要冷凍。
保質期：該產品有效期為1年，生產日期見包裝盒。