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閱讀：39發(fā)布時(shí)間：2023-6-20
隨著國(guó)家對(duì)環(huán)境問(wèn)題的日益重視，越來(lái)越多的檢測(cè)設(shè)備和技術(shù)應(yīng)用于水質(zhì)檢測(cè)中，其程控定量封口機(jī)檢測(cè)大腸菌群以操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)時(shí)間短、結(jié)果可靠而被廣泛應(yīng)用。那么，我們?cè)谑褂贸炭囟糠饪跈C(jī)時(shí)應(yīng)注意哪些問(wèn)題？下面我們一起看看。
采用酶底物法檢測(cè)水中糞大腸菌群是將已加入培養(yǎng)基的水樣混勻與97孔定量盤(pán)，置于44.5±0.5℃培養(yǎng)24h，糞大腸菌能在該溫度產(chǎn)生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)，分解選擇性培養(yǎng)基中的鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖(ONPG)生成黃色的鄰硝基，通過(guò)定量盤(pán)大小孔顯黃色數(shù)查詢(xún)酶底物法的MPN表，計(jì)算出糞大腸菌群的濃度。但是我們?cè)诓僮鞯倪^(guò)程中需要特別注意以下幾點(diǎn)：
1、樣品稀釋的合理性
通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用酶底物法檢測(cè)糞大腸菌群，水樣稀釋倍數(shù)越高，其測(cè)定的數(shù)值就越低，所以我們?cè)谌粘z測(cè)工作中，應(yīng)該根據(jù)具體的情況對(duì)水樣進(jìn)行逐一做小倍數(shù)的稀釋?zhuān)@樣即可以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度，又可以提高數(shù)據(jù)的真實(shí)性。
2、樣品的均勻性
我們?cè)诿看稳≡簳r(shí)，取樣的均勻度也會(huì)直接影響到后面的稀釋結(jié)果，所以說(shuō)在每次取樣前需要充分搖勻，并盡快與培養(yǎng)基混合，否則會(huì)出現(xiàn)結(jié)果差異性很大，并且失去了該方法的穩(wěn)定性。
3、溫度培養(yǎng)的恒定性
使用酶底物法檢測(cè)糞大腸菌群時(shí)，培養(yǎng)溫度要按照要求設(shè)定，樣品在培養(yǎng)箱中于44.5℃培養(yǎng)，誤差控制在±0.5℃，溫度偏低或偏高都會(huì)直接影響到檢測(cè)結(jié)果。
4、培養(yǎng)時(shí)間的重要性
培養(yǎng)時(shí)間的長(zhǎng)短也是會(huì)影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，我們通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)對(duì)比，發(fā)現(xiàn)使用酶底物法檢測(cè)糞大腸菌群培養(yǎng)16~24h的檢測(cè)結(jié)果與24h相比均有這明顯的差異，而培養(yǎng)22~28h與24h結(jié)果差異不顯著。因此，使用酶底物法檢測(cè)總大腸菌群的培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)該在22~28h之間是可以得到準(zhǔn)確的結(jié)果。
5、其他注意點(diǎn)：
（1）在使用該儀器時(shí)需要配合使用51孔/97孔定量檢測(cè)盤(pán)；
（2）檢測(cè)樣品/試劑混合液需要分配到獨(dú)立的孔中；
（3）51孔定量盤(pán)可檢測(cè)每100mL水樣中1-200MPN值。
（4）97孔定量盤(pán)可檢測(cè)每100mL水樣中1-2,419MPN值。
（5）整個(gè)檢測(cè)過(guò)程手工操作時(shí)間小于1分鐘。
以上就是為大家分享的關(guān)于程控定量封口機(jī)檢測(cè)大腸菌群時(shí)需要注意的事項(xiàng)，希望可以幫助到大家！
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