產品描述：
膠原酶IV 是一種蛋白酶，一種肽鏈內切酶，能夠特異性的識別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現在膠原中，很少發現于其他蛋白中）并切割該序列中性氨基酸（X）和gan氨酸（Gly）之間的肽鍵。
使用說明：
本品為 IV 型膠原酶，≥125 CDU/mg solid（CDU = collagen digestion
units），特別適用于胰島組織的消化。
在 37℃，pH7.5 的條件下，5 h 內水解膠原產生相當于 1 µM L-liang氨酸的
酶量定義為 1 個酶活力單位。
IV 型膠原酶應以粉末形式在 2-8℃下保存，直到可以使用為止。可以將
IV 型膠yuan酶溶液等分并保存在 -20℃，但不應反復凍融。
使用方法：
1、膠原酶儲存液的配制
向每管 100 mg 的膠原酶中加入 1 mL 的含 Ca2+、Mg2+的 HBSS（Hank’s pingheng鹽溶液，含 Ca2+、Mg2+），輕輕旋渦震蕩使其充分溶解，制備成
100 mg/mL（即 100×）的儲存液。然后用低蛋白結合性的 0.22 μm 的濾膜過
濾除菌，分裝成小份量，然后于-20℃避光凍存。
使用前于冰上解凍，避免反復凍融。其用于組織和細胞分散的常用濃度
為：0.5-2.5 mg/mL，用于軟骨消化的常用濃度為 1-2 mg/mL，需要根據特定
的實驗條件或者參考相應的文獻資料確定所需的佳工作濃度。
2、組織的分離
1.使用無菌手術dao或剪刀將組織切成 3-4 mm 大小的組織塊；
2.利用含 Ca2+、Mg2+的 HBSS 洗滌組織塊數次；
3.加入足量的含 Ca2+、Mg2+的 HBSS，使其浸沒組織塊，并加入膠原酶至需
要工作濃度；
4.于 37℃孵育 4-18 h。消化時使用水平搖床以及用 3 mM 的 CaCl2 補充消化
可以提高消化效率。
5.已分散開的細胞可使用不銹鋼或尼龍網篩篩得，收集備用。未全解離的
組織另外添加適量的新鮮膠原酶工作液于 37℃繼續孵育；
6.利用不含膠原酶的 HBSS 洗滌收集的細胞數次；
7.細胞培養液重懸上述細胞，利用自動細胞計數器或其他方法計算活細胞密度。
8.于細胞培養皿上利用合適細胞培養基接種細胞。
3、器官灌注
1.向37℃預熱的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入膠原酶，另添加3 mM的CaCl2
有助于提高分離效率；
2.按照已優化的速率對相應的器官灌注膠原酶工作液；
3.將上述過程中回收的灌注液流經不銹鋼或尼龍網篩，從而將已解離的細胞
或小片段組織塊與較大團塊分離開來，未充分解離的組織需利用新鮮膠原
酶工作液于 37℃進一步孵育；
4.利用不含膠原酶的 HBSS 洗滌收集的細胞數次；
5.細胞培養液重懸上述細胞，利用自動細胞計數器或其他方法計算活細胞密度。
6. 于細胞培養皿上利用合適細胞培養基接種細胞。
關于膠原酶IV型的要點：
功能：膠原酶IV型是一類金屬蛋白酶，能夠特異性地切割和降解IV型膠原蛋白，這在組織修復、腫瘤侵襲和轉移等生理和病理過程中起著重要作用。
應用：在研究中，膠原酶IV型可用于研究細胞外基質的降解機制，以及在腫瘤生物學中研究腫瘤細胞如何通過降解基底膜來侵襲周圍組織。
來源：膠原酶IV型可以由多種細胞類型產生，包括成纖維細胞、上皮細胞、腫瘤細胞等。
活性：這種酶的活性通常依賴于特定的金屬離子，如鋅離子，它們是酶活性中心的一部分。
抑制：在某些情況下，可能需要抑制膠原酶IV型的活性，以防止過度的組織損傷或控制病理過程。這可以通過使用特定的抑制劑來實現。
臨床意義：在某些疾病中，如腫瘤、炎癥性疾病和自身免疫性疾病，膠原酶IV型的活性可能異常升高，這可能導致組織損傷和疾病進展。
研究：膠原酶IV型的研究有助于開發新的治療方法，如通過抑制其活性來治療某些疾病。
產品形式：在實驗室研究中，膠原酶IV型通常以商業化的酶制劑形式提供，可以用于各種生物學實驗。
