Annealing Buffer for DNA Oligos (5×)，即 DNA 寡核苷酸退火緩沖液，該退火緩沖液不僅可以用于常規 DNA Oligos 的退火，而且特別適合于較難退火的構建 RNAi（siRNA 和 shRNA）質粒的 DNA Oligos，可以有效避免 DNA Oligos 自身形成發夾結構，并且兩條 Oligos 退火后可以直接和經酶切純化的質粒連接。

詳細介紹

產品簡介

保存條件

常溫配送。一個月內，4 oC 保存。-20 oC 長期保存，至少1年有效。

注意事項

1. DNA 退火緩沖液（5×）只適合于 DNA Oligos 的退火，不能用于 RNA Oligos 的退火。

2. 本產品僅用于科學研究，不得用于臨床診斷和治療，不得用于食品和藥品，不得存放于普通住宅內。

使用說明

1.將 Oligos 干粉用雙蒸水配制成 50 µM，融化 DNA 退火緩沖液（5×） ，混勻備用。

2.配置如下退火反應體系，混勻。

Nuclease-Free Water 40 µL

DNA 退火緩沖液（5×） 20 µL

DNA Oligo A (50 μM) 20 µL

DNA Oligo B (50 μM) 20 µL

總體積 100 µL

3.退火方法一：將退火反應體系置于 PCR 儀中，設置反應條件： 95℃變性 2 min， -1℃/30s/cycle 緩慢降溫至 25℃。程序設置以 Bio-Rad 的 T100 為例為： 1. 95℃, 2:00; 2. 95℃, 0:30, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2,70X; 4. 4℃, ∞。

對于易形成發卡結構的 Oligos 可以延長時間降溫時間： 95℃變性 2 min， -1℃/90s/cycle 緩慢降溫至25℃。程序設置以 Bio-Rad 的 T100 為例為： 1. 95℃, 2:00; 2. 95℃, 1:30, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2,70X; 4. 4℃, ∞。

4.退火方法二：將退火反應體系放于 95°C 水浴鍋或金屬浴，持續 2 min，后將退火反應體系置于一杯 95°C的水中，讓其自然冷卻至室溫。若是易形成發卡結構的 Oligos，可以將95°C 水放于保溫杯中開蓋降溫。
Note：緩慢降溫對形成正確的結構是非常有幫助的，降溫過快將導致錯誤結構的產生。

5.退火結束后可直接用于連接反應，也可以-20oC 凍存備用。若進行酶切等其它反應，更好用純化試劑盒進行純化，或者確保退火產物在反應體系中體積不超過 5%，以避免退火緩沖液對后續酶反應體系的干擾。

6.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

相關產品

產品編號	產品名稱	產品規格
JY03011/JY03012	慢病毒濃縮試劑盒	50 mL/100 mL
JY03013/JY03014	PEG-8000慢病毒濃縮液	50 mL/100 mL
JY03021/JY03022/JY03023	慢病毒包裝劑盒	10T/20T/40T (10cm dish)
JY03024/JY03025/JY03026	慢病毒包裝質粒Mix	100 μg/200 μg/400 μg
JY03061/JY03062	全套第二代慢病毒包裝質粒（三質粒系統）	1 μg/100 μg per plasmid
JY03063/JY03064	全套第三代慢病毒包裝質粒（四質粒系統）	1 μg/100 μg per plasmid
JY03027/JY03028	慢病毒包裝質粒 pMD2.G	1 μg/100 μg
JY03029/JY03030	慢病毒包裝質粒 psPAX2	1 μg/100 μg
JY03031/JY03032	慢病毒包裝質粒 pCMV-VSV-G	1 μg/100 μg
JY03033/JY03034	慢病毒包裝質粒 pCMV-dR8.91	1 μg/100 μg
JY03035/JY03036	慢病毒包裝質粒 pMDLg/pRRE	1 μg/100 μg
JY03037/JY03038	慢病毒包裝質粒 pRSV-Rev	1 μg/100 μg
JY04013/JY04014	RNA退火緩沖液（5×）	2 mL/5 mL
JY04011/JY04012	DNA退火緩沖液（5×）	2 mL/5 mL
JY02066/ JY02088	人臍帶間充質干細胞 P2 P3	1×10? cells
JY05021/JY05022/JY05023	PKH26試劑盒細胞膜、囊泡、外泌體標記	0.1 mL/0.2 mL/0.5 mL
JY03041	293T，HEK-293T，人胚腎細胞	> 1×10? cells