一、什么是分光光度計?
A.分光光度計是一種測量樣品吸收的光量的儀器。
B.分光光度計技術通常用于通過測量放置在分光光度計中的比色杯中溶液吸收的光量來測量溶液中的溶質濃度。
C.國家技術實驗室(NTL)的科學家Arnold J. Beckman及其同事于1940年發明了Beckman DU分光光度計。
二、分光光度計的原理
分光光度計技術是根據波長測量光強。它通過將光束衍射到一個波長光譜中,使用電荷耦合器件檢測強度,然后將結果以圖形形式顯示在檢測器上,然后顯示在顯示設備上來實現。
A.在分光光度計中,使用棱鏡(或)光柵將入射光束分成不同的波長。
B.通過適當的機制,可以操縱特定波長的波落在測試溶液上。入射光的波長范圍可以低至1-2nm。
C.分光光度計可用于測量化合物的吸收光譜,即溶液在每個波長下對光的吸收。
三、分光光度計儀器的基本組件包括:
1.桌子和廉價的輻射能源
可以通過高壓放電(或電加熱)激發到高能態的材料是優良的輻射能源。
2.單色儀,將多色輻射分解為多個波長的組成波段。
單色儀將多色輻射分解成單獨的波長,并將這些波長隔離成非常窄的波段。
3.棱鏡:
棱鏡通過在不同程度上反射不同波長的能力,將來自光源的多色光分散到其組成波長中.
商用儀器通常使用兩種棱鏡。即600角石英棱鏡和300利特羅棱鏡。
4.柵欄:
光柵通常用于紫外、可見光和紅外區域的分光光度計的單色器中。
5.用于保存樣品的運輸容器(反應杯)
在紫外(或)可見光區域進行研究的樣品通常是玻璃(或)溶液,放在稱為“試管”的試管中。
用于可見光區域的比色杯由普通玻璃(或有時是石英)制成。
6.光敏探測器及相關讀出系統
大多數探測器依賴于光電效應。電流與光的強度成正比,因此是對它的測量。
輻射探測器產生與發射器光成比例的電子信號。
這些信號需要轉換成易于理解的形式。
這是通過使用放大器、電流表、電位計和電位記錄器來實現的。
四、分光光度計的一些主要應用領域:
物質濃度檢測
雜質檢測
有機化合物的結構闡明
監測淡水和海洋生態系統中的溶解氧含量
蛋白質表征
檢測官能團
醫院呼吸氣體分析
化合物的分子量測定
可見光和紫外分光光度計可用于識別純態和生物制劑中的化合物類別。
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