天根試劑盒FP209-Talent熒光定量檢測試劑 -熒光定量pcr試劑盒

產品簡介：
     天根試劑盒FP209-Talent熒光定量檢測試劑 -熒光定量pcr試劑盒 采用SYBR Green I嵌合熒光法進行Real-Time PCR的專用試劑，可對目標DNA進行快速、特異性的定量檢測。優化的預混液可縮短Real-Time PCR的反應時間，適用于標準或快速PCR儀。
     2 × Talent qPCR PreMix采用了抗體修飾的Anti Taq DNA聚合酶，配合優化的qPCR Buffer體系可確保本產品在所有的Real-Time PCR儀上進行高靈敏的快速qPCR反應，qPCR反應時間可縮短50%。此外，Buffer中添加了的H-Competitor因子和EP組分，還使得本產品具有廣泛的樣本普適性，對具有復雜高級結構的模板、PCR抑制劑殘留較多的模板以及長片段擴增等具有非常好的適用性。同時本產品還具有高擴增效率，高擴增特異性和寬廣的可信范圍等特點，在不影響PCR效果的前提下更快獲得結果，節約科研時間和能源。

產品特點：
●  高靈敏的抗體修飾聚合酶，反應時間縮短一半
●  H-Competitor因子競爭氫鍵，特別應對高GC模板、復雜二級結構模板和長片段模板
●  EP組分穩定PCR體系，有效的保護酶活，抵御各種抑制劑的干擾
●  無色透明管代替棕色管，小改動蘊含大智慧

下游應用

適用于在各類熒光定量儀器上采用SYBR Green 法進行表達分析及核酸檢測等類型實驗，尤其適合高GC、復雜二級結構、雜質殘留量高及長片段模板定量時使用。

實驗例：

圖1. 使用TIANGEN Talent qPCR PreMix（FP209，左）及國外A 公司（中）、B 公司（右）的同類產品定量人類UH11 基因（GC：73.4%），展示擴增曲線、熔解曲線和標準曲線。DNA 使用量分別為20 ng，2 ng，200 pg，20 pg，2 pg。結果顯示，與競品相比TIANGEN FP209對于5個濃度梯度定量清晰，Ct 值靠前，熔解曲線峰型正常，標準曲線相關系數高。TIANGEN FP209 對高GC 模板具有良好的適應性和擴增效率。

圖2. 使用TIANGEN Talent qPCR PreMix（FP209，左）及國外A 公司（中）、B 公司（右）的同類產品定量人類H2 基因，模板為使用TIANGEN KG203 粗提的人類293T 細胞系的基因組DNA（具有較多雜質），展示擴增曲線和熔解曲線。展示擴增曲線和熔解曲線。結果顯示，與競品相比TIANGEN FP209 定量Ct 值靠前，熔解曲線峰型正常。TIANGEN FP209 對雜質含量高的模板具有優秀的抵抗力，保持較高的擴增效率。

圖3. a：FP209（左）與FP205（右）包裝管對比。使用無色透明管包裝可以清楚看到管內剩余試劑量以及是否融化。b. 分別使用-20℃避光保存的FP209（左）與室溫光照放置10 小時的FP209（右），定量不同起始濃度的人類H2 基因，展示擴增曲線、熔解曲線和Ct 值（U.D.:Undetected）。結果顯示，兩組結果無明顯差異，光照對定量結果無影響，使用無色透明管包裝不會影響產品質量。

1. 2 × Talent qPCR PreMix采用了抗體修飾的Anti Taq DNA聚合酶，配合特制的快速qPCR Buffer體系，可大大縮短變性、退火與延伸時間，可節省多達50%的反應時間，快速獲得 實驗結果。

 2. 本產品中特別添加了H-Competitor因子，能夠競爭氫鍵、增強雙鏈的打開強度，使本產品具 有廣泛的樣本普適性，對具有復雜高級結構的模板和長片段擴增等具有非常好的適用性。

 3. 本產品特制的快速PCR Buffer體系含有的PCR穩定因子——EP，能夠有效的保護酶 活，抵御各種PCR抑制劑的干擾，保證了2 × Talent qPCR PreMix高擴增效率，高擴增 特異性、高擴增靈敏度和寬廣的可信范圍的特點。

 4. 2 × Talent qPCR PreMix中預混有SYBR Green I，PCR反應液配制時，只需加入模板、 引物、滅菌蒸餾水便可進行快速Real-Time PCR反應，操作簡單方便。

 5. 本產品附帶ROX Reference Dye，用于消除信號本底以及校正孔與孔之間產生的熒光信號 誤差，方便客戶針對不同型號熒光定量PCR儀時選擇對應濃度使用。 

6. 2 × Talent qPCR PreMix采用無色透明管包裝，經檢測，光照不會影響體系的定量的結果。 

試劑盒原理 

本產品采用了特異的抗體修飾熱啟動DNA聚合酶進行快速PCR擴增，通過檢測反應進程中 SYBR Green I 的熒光強度，達到檢測PCR產物擴增量的目的，適用于標準和快速PCR儀。

 1. 本產品中特異的抗體修飾熱啟動DNA聚合酶，95℃條件下孵育3 min即可激活全部酶活， 在縮短變性時間的同時避免了非特異性產物的擴增，可大大縮短變性、退火和延伸時 間，使PCR總運行時間縮短50%，更快獲得實驗結果，而不影響PCR反應效果。

 2. 本產品的快速PCR Buffer體系添加了的H-Competitor因子和EP組分，配合精心優化 的快速PCR Buffer體系，對具有復雜高級結構的模板、PCR抑制劑殘留較多的模板以及 長片段擴增等具有非常好的適用性。

 3. 本產品針對cDNA模板和gDNA模板結構組成的差異，對PCR的體系反應步驟進行了特別 的優化，使較難擴增的gDNA模板也能獲得良好的PCR結果。

 注意事項

 1．如果試劑沒有混勻，其反應性能會有所下降。使用時請上下顛倒輕輕混勻，請不要使用 振蕩器進行混勻，盡量避免出現泡沫，并經瞬時離心后使用。

 2．引物純度對反應特異性影響很大，建議使用PAGE級別以上純化的引物。 

3．引物終濃度為0.3 μM可以在大多數體系中獲得良好的擴增結果。如果需要進一步優化， 可以在 0.2-0.5 μM范圍內調整引物濃度。 

4．20 μl反應體系中，cDNA模板的使用量一般小于100 ng，基因組DNA模板量一般小于50 ng，逆 轉錄產物作為模板時，使用量應不超過PCR體系終體積的20%。