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mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針,可用于免疫熒光、流式細胞術

時間:2024/11/28閱讀:69
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  AAT Bioquest 生產的小麥胚芽凝集素(WGA)能與N-乙酰葡萄糖胺和唾液酸結合,是目前研究多且有用的凝集素之一。小麥胚芽凝集素可用于標記細胞膜(如:活細胞、固定細胞、組織切片、酵母、革蘭氏陽性細菌及真菌等 ),從而進行熒光成像和分析。也可用于免疫熒光(IF)、免疫組織化學(IHC)和流式細胞術(FC)。


image.png

1.HeLa 細胞用濃度為 10 µg/mL 的 mFluor™ Violet 450芽凝集素 (WGA) 探針染色 30 分鐘。使用配備紫羅蘭濾光片組的熒光顯微鏡獲取的圖像。


mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針優勢:

1.應用廣泛;

2.不受膜電位控制;

3.用于細胞膜表面的標記,有助于膜結構的成像


mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針參數

Ex(nm)406
Em(nm)445
 Water
存儲條件-15℃以下保存,避光防潮







mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針適用儀器

 

熒光顯微鏡

Ex 406nm
Em445nm
推薦孔板黑色透明底板

 

        

mFluor Violet 450小麥胚芽凝集素(WGA)探針實驗方案

樣品分析方案

溶液配制

儲備溶液配制 

mFluor 450 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物儲備液 (200X)

500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中,制成 2 mg/mL 的儲備溶液。

注意:重新配制的綴合物溶液可在 2-8 °C 下短期儲存,或在 -20 °C 下長期儲存。

 

工作溶液配制 

mFluor 450 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物工作溶液 (1X)

5 μL 200X WGA 儲備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。

注意:不同細胞系的優化染色濃度可能不同。 活細胞的推薦起始濃度為 5-10 µg/mL。

 

操作方案

活細胞染色

1. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。

2. 添加 100 µL mFluor 450-WGA 工作溶液。

3. 將細胞與 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。

5. 使用 Ex/Em = 406/445 nm在熒光顯微鏡上成像細胞。

 

固定細胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定細胞。

注意:對于固定細胞膜染色,建議在沒有透化步驟的情況下進行染色。固定后透化步驟會導致細胞內區室染色,如高爾基體和內質網 (ER) 結構染色。

2. 添加 100 µL mFluor 450-WGA 工作溶液。

3. 在室溫下,用 WGA 工作溶液孵育細胞 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。

5. 使用Ex/Em = 406/445 nm在熒光顯微鏡上成像細胞。


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