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目錄:上海聯祖生物科技有限公司>>生化試劑盒>>三羧酸循環系列>> MCS甲基檸檬酸合酶測試盒微量法

MCS甲基檸檬酸合酶測試盒微量法
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更新時間:2022-05-20 14:49:18瀏覽次數:967評價

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貨號 LZ-01591S
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常見樣本處理方法:

1、血清(漿)樣品:直接檢測。

2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量

104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細菌或細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,

加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

分類

貨號

MCS甲基檸檬酸合酶測試盒微量法

100管/96樣

三羧酸循環系列

LZ-01591S

商品介紹:

測定意義

MCS廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體基質中,與檸檬酸合酶(CS)共同參與三羧酸循環的調節。

測定原理:

MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產生甲基檸檬酰輔酶,進一步水解產生甲基檸檬酸;該反應促使無色的DTNB轉變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水
特點:

1、優化設計的實驗方案,1小時即可完成

2、靈敏度高,操作便捷

3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑


QQ截圖20220307153604.png

測定步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫浴

1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質量和軟件的算法。

注意事項:

①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

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