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目錄:上海聯祖生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T豬細小病毒PCR檢測試劑盒廠家

豬細小病毒PCR檢測試劑盒廠家
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參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
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  • 品牌 其他品牌
  • 型號 50T
  • 廠商性質 代理商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2021-03-13 14:32:23瀏覽次數:1184評價

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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 豬細小病毒PCR檢測試劑盒廠家

 規格

 50T

 貨號

 LZP7918

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
L-精氨酸SNAT1/SLC38A1 (D9L2P) Rabbit mAbBoc-1-氨基環戊烷羧酸

L-精氨酸鹽酸鹽DIDO1 Antibody氟甲

DL-精氨酸RanGAP1 (D2T7T) Rabbit mAb2-(三酰)吡咯

L-纈氨酸NCAM (CD56) Antibody三氟化-二甲絡合物

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L-異亮氨酸Notch1 (D1E11) XP® Rabbit mAb二氟溴酸

L-蘇氨酸CDK10 (D8Z7Z) Rabbit mAb氨基甲酰

DL-蘇氨酸Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) Antibody1,1,1-三三氟烷

L-氨酸Tuberin/TSC2 Antibody五氟烷

L-天冬酰;L-天冬酰一水  Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571) Antibody2-氨基-3,5-二溴吡啶

L-甲硫氨酸(標準品)Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) Antibody全氟己基烷

L-甲硫氨酸Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) Antibody1-叔丁基-

L-胱氨酸HIF-1α (D1S7W) XP® Rabbit mAb3,5-二甲基哌啶

L-胱氨酸鹽酸鹽HIF-1α (D1S7W) XP® Rabbit mAb4,5-二甲基噻唑

L-半胱氨酸Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) Antibody氨基-羥基磺酰

L-半胱氨酸(標準品)Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAb2,3,4,5-四甲氧

L-半胱氨酸鹽酸鹽,一水Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAb1,5-二-戊酮

DL-半胱氨酸CDC37 (V297) Antibody2,5-二甲氧基

鈣調素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)ELISA試劑盒SLC24A5  可溶性載質轉運蛋白SLC24A5100 ul

鈣調素(CAM)ELISA試劑盒Slc26a5  Slc26a520 ul

鈣調酸酶(CaN)ELISA試劑盒SLC6A19  鉀依賴鈉鈣交換蛋白6100 ul

鈣調蛋白依賴性蛋白激酶激酶(CaMKK)ELISA試劑盒SLC16A3/MCT-4  MCT420 ul

富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒Smac/DIABLO  線粒體促凋亡蛋白100 ul

復制蛋白A 70kDaDNA結合亞基(RPA1)ELISA試劑盒SLC33A1  酰輔酶A轉運蛋白120 ul

脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒SLC34A2  酸鈉協同轉運蛋白100 ul

縫隙連接蛋白α1,43kDa(GJA1)ELISA試劑盒SMN1  運動神經元生存蛋白120 ul

封閉蛋白4(CLDN4)ELISA試劑盒Slit2/Slil3  神經遷移蛋白Slit2/3100 ul
豬細小病毒PCR檢測試劑盒廠家表皮生長因子抗體(小鼠)N-Acetyl-L-tyrosine中文名:乙酰酪氨酸別名:分子式:C11H134

表皮生長因子抗體(大鼠)4-Acetylbiphenyl中文名:4-乙酰基聯苯別名:分子式:C14H12O

豬源產腸毒素性大腸桿菌K88-K99抗體N-Acetyl-m-toluidine中文名:N-乙酰間甲別名:分子式:C9H11

表皮生長因子受體III型突變體抗體Allopuril中文名:別嘌醇別名:分子式:C5H4N4O

eIF4E結合蛋白抗體Adipic dihydrazide中文名:己二酸二酰肼別名:分子式:C6H14N4O2
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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