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目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅱ系列>> NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒紫外分光光度法

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒紫外分光光度法
  • NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒紫外分光光度法
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具體成交價以合同協議為準
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更新時間:2023-12-29 14:06:34瀏覽次數:1167評價

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貨號 BK-01S6360
NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒紫外分光光度法輔酶Ⅱ系列公司正在出售的產品:含100mlBolton肉湯均質袋 英文名稱:Bolton Broth 產品規格:10個/包 Bolton肉湯添加劑 英文名稱:Bolton Broth Supplement 產品規格:1ml/支*5 含225ml胰酪胨大豆肉湯均質袋 英文名稱:Trypticase Soy Polymyxin Broth 產品規格:10

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱:NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒紫外分光光度法

產品規格:50管/48樣

檢測方法:紫外分光光度法

產品貨號:BK-01S6360

產品分類:輔酶Ⅱ系列
商品介紹:

測定意義:

ME廣泛存在于微生物、培養細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應,產生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應,是蘋果酸代謝的關鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關。近年來植物ME活性測定較多,已經成為抗氧化研究的熱點。根據輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)NADP-ME(EC1.1.1.40)

測定原理:

NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測定NADH增加速率。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

改良馬丁液體培養基  250ml*20瓶

2 ug pSTAT1-Luc pSTAT1-Luc 低溫運輸,-20℃保存

乳糖膽鹽發酵培養基顆粒 Lactose Bile Broth 300ml/袋*10

10次 克必隆eTS 超敏PCR法cDNA合成試劑盒  

50mL Nickel Sulfate Solution(硫酸鎳溶液),0.5M  Nickel Sulfate Solution,0.5M  常溫保存

20次 即用型藍白T載體D型(無啟動子,有MCS) Instant Blue-White Vector T,Type D -20℃保存

2 ug pMKO.1-puro pMKO.1-puro 低溫運輸,-20℃保存

酵母浸粉(進口) Yeast Extract Powder 250g

1瓶 SP2/0細胞株 SP2/0 低溫運輸和保存

BPL瓊脂 BPL Agar 250g

2 ug pIRES2-AcGFP1 pIRES2-AcGFP1 低溫運輸,-20℃保存

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒紫外分光光度法ARK5  AMPK的相關蛋白激5抗體 規格: 0.2ml

Rabbit anti-Biotin whole serum  兔抗抗清 規格: 1ml

Goat anti-Mouse IgM whole serum  羊抗小鼠IgM抗清 規格: 1ml

phospho-Myosin light chain(Ser20)  磷酸化肌球蛋白輕鏈抗體 規格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規格: 0.1ml

Phospho-Bcr(Tyr177)  磷酸化T淋巴細胞受體抗體 規格: 0.1ml

Hornerin/S100A18  角化蛋白S100A16抗體 規格: 0.2ml

CCDC16/zinc finger protein 830  鋅指蛋白830抗體 規格: 0.2ml

Histone H3-like protein  組蛋白H3樣抗體 規格: 0.2ml

Streptokinase  鏈激抗體 規格: 0.1mlMast Cell Chymase  肥大細胞類糜蛋白1抗體 規格: 0.2ml

Galectin 7  半糖凝集素7抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-Avidin/FITC  FITC標記的兔抗親和素 規格: 0.1ml

PPAP2A  磷酸脂磷酸水解1抗體 規格: 0.1mlP2Y4  P2Y4受體抗體 規格: 0.1ml 

 


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