目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 羥自由基清除能力測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S6441 |
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注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱：羥自由基清除能力測試盒微量法
產品規(guī)格：100管/96樣
檢測方法：微量法
產品貨號：BK-01S6441
產品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
測定意義: 羥自由基作用于體內蛋白質、核酸、脂類等生物分子，造成細胞結構和功能受損，進而導致體內代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應用。 測定原理： H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應產生羥自由基，水楊酸能有效捕捉產生的羥自由基并與其反應生成有色物質2，3-二羥基苯甲酸，在510nm處有最大吸收峰，加入具有清除能力的物質后，有色物質便會減少，從而可以根據吸光值的數值判斷樣品清除羥自由基的能力。 自備實驗用品： 恒溫水浴鍋、酶標儀、96孔板和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
500g 牛肉蛋白胨 Peptone Beef 室溫保存
50T 人黏附分子-1基因K469E多態(tài)性檢測試劑盒(PCR-RLFP) 低溫運輸，-20℃保存
50 mg Carboxy-PTIO （一氧化氮清除劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH4.5 Citrate Buffer,0.5M,pH4.5 常溫保存
1mL 鮭魚精DNA溶液（10mg/mL） Salmon Sperm DNA Solution -20℃保存
2 ug pHT01 pHT01 低溫運輸，-20℃保存
100g 三 Trichloroacetic Acid 4℃保存
2 ug pPZp-RCS2-Bar pPZp-RCS2-Bar 低溫運輸，-20℃保存
葡萄糖半固體 20支
2 ug pCAMBIA3301 pCAMBIA3301 低溫運輸，-20℃保存
嗜鹽性試驗用胰胨水 Halophilic experimental medium 250g
羥自由基清除能力測試盒微量法Lin-28B RNA結合蛋白LIN28B抗體 規(guī)格: 0.2ml
G protein beta 1/GNB1 G蛋白β1抗體/核苷酸結合蛋白β亞基1 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-cdc25C (Thr48) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 磷酸化蛋白激C β1/β2(Thr500)抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Histone H3(Ser28) 磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.1ml
DPPL1 磷脂酸磷酸HTPAP抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM123B/AMER1 母細胞瘤X蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
EPEC/E.coli 腸致性大腸桿菌抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) 磷酸化細胞質膜微囊蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml
BTG2/TIS21 B細胞遷移基因2抗體 規(guī)格: 0.1ml
TWIST protein TWIST蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
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