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| 貨號 | BK-01S6474 |
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特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱：多功能氧化酶(MFO)測試盒微量法
產品規格：100管/96樣
檢測方法：微量法
產品貨號：BK-01S6474
產品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
測定意義: 多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶，可產生降解反應，可使原化學物質變為低毒的或無毒的物質從體內排出；還可產生激活反應，可使原化學物質轉化為具有親電子性質，導致毒性增強，成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學物質相互作用的深入研究，對于從分子生物學水平上進一步了解外源性化學物質的毒作用具有重要意義。 測定原理： MFO催化對硝基苯甲醚產生對硝基，在405nm下有特征吸光值。 自備用品： 分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
5g 3- 氨基 -9- 乙基咔唑 AEC (3-Amino-9-Ethylcarbazole) 常溫保存
100mL TES Buffer,0.2M,pH7.0 TES Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存
100µL 小鼠抗CBP標簽單抗 Anti CBP-Tag Mouse MAb -20℃保存
2 ug pTALEN_v2 (NG) pTALEN_v2 (NG) 低溫運輸，-20℃保存
100g RNCTAB (十六烷基基) 常溫
2 ug pDEST20 pDEST20 低溫運輸，-20℃保存
梭菌鑒別瓊脂（DCA） Differentia Clostridial Agar 250g
150mL 丙烯葡聚糖凝膠 S-300 HR Sephacryl S-300 HR 室溫保存
TTC TTC 10g
2 g Tocopherol（抗氧化劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250ml Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH2.5 Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH2.5 常溫保存
多功能氧化酶(MFO)測試盒微量法TRIM36/RNF98 環指蛋白98抗體 規格: 0.2ml
Biglycan 骨/軟骨蛋白多糖1抗體 規格: 0.2ml
GM1(GS) 神經節苷酯抗體 規格: 0.1ml
DECTIN-1/CLECSF12/beta Glucan Receptor β葡聚糖受體抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗馬IgG 規格: 0.1ml
FAM151A FAM151A蛋白抗體 規格: 0.2ml
NME1/Nm23-H1/NDKA 瘤抑制基因抗體 規格: 0.1ml
FAM71A FAM71A蛋白抗體 規格: 0.2ml
srGAP3 神障礙相關GAP蛋白抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗馬IgM 規格: 0.1ml
JAMC 連接粘附分子C抗體 規格: 0.2ml
BAGE4 瘤/睪抗原2.4抗體 規格: 0.2ml
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
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