目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖酵解系列>> 果糖1,6二磷酸醛縮酶(FBA)測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S6619 |
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本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
果糖1,6二磷酸醛縮酶(FBA)測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6619 |
商品介紹：
測定意義: 植物葉綠體中果糖1,6-二磷酸醛縮酶是光合作用中參與calvin循環的重要酶。催化果糖1,6-二磷酸和景天庚酮糖1,7-二磷酸的合成反應，在各種逆境脅迫下表現不同的響應。 測定原理 果糖1,6-二磷酸醛縮酶催化果糖1,6-二磷酸生成3-磷酸甘油醛和磷酸二羥丙酮，在磷酸丙糖異構酶和α-磷酸甘油脫氫酶作用下催化NADH和磷酸二羥丙酮生成NAD和α-磷酸甘油，340nm處吸光值的變化可反映果糖1,6-二磷酸醛縮酶活性的高低。 自備實驗用品及儀器 天平、震蕩儀、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求：
① 易揮發、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據待檢測樣品(包括標準品) 數量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現稀釋現使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
1瓶 Ana-1細胞株 Ana-1 低溫運輸和保存
10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯培養基顆粒 10% Trypticase Soy Broth 225ml/袋*10
50次 DOP-PCR試劑盒 DOP-PCR Kit -20℃保存
500mL MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA），10X MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA），10X 常溫保存
20次 DNA粘轉平試劑盒 DNA Polishing Kit -20℃保存
2 ug pMIG-PP2A-Abeta pMIG-PP2A-Abeta 低溫運輸，-20℃保存
牛膽鹽 Bile Salt 100g
1瓶 SK-MES-1細胞株 SK-MES-1 低溫運輸和保存
腦心浸出液肉湯（BHI）GB標準 Brain Heart Influsion Broth 250g
50mL 二甲基亞砜 ( 細胞培養級 ) Dimethyl Sulfoxide（DMSO） 室溫干燥避光保存
50T 登革熱病毒Ⅰ、Ⅱ型分型PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
果糖1,6二磷酸醛縮酶(FBA)測試盒微量法TNFR2/TRAF2/CD120b 瘤壞死因子受體相關因子2抗體 規格: 0.1mlUTS2R/GPCR GPR14 G蛋白偶聯受體14抗體 規格: 0.1ml
ATP6V1G2/V-ATPase G2 離子轉運ATP合成6G抗體 規格: 0.2mlLigamentum Nuchae Elastin 項韌帶彈性蛋白抗體 規格: 0.2ml
UBCH6/UBE2E1 泛素蛋白連接E1抗體 規格: 0.2mlsVEGFR2 可溶性管內皮生因子受體2抗體 規格: 0.1ml
Phospho-MKK3(Ser189)/MKK6(Ser207) 磷酸化絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗體 規格: 0.1mlMARCH11 膜相關環指蛋白11抗體 規格: 0.2ml
phospho-GAB2(Ser623) 磷酸化接蛋白Gab2抗體 規格: 0.1mlPACRG 麻瘋和帕金森氏共同調節蛋白抗體 規格: 0.2ml
NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH氧化4抗體 0.1ml
Rabbit anti-Avidin whole serum 兔抗親和素抗清 規格: 1ml
PGCP 漿谷羧肽抗體 規格: 0.2ml
XDH/Xanthine Oxidase 氧化抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-MK IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗猴IgM 規格: 0.1ml
Socs 1 細胞因子信號傳導抑制蛋白1抗體 規格: 0.1ml
RENT1/hUPF1 ATP依賴解旋RENT1抗體 規格: 0.2ml
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