目錄:上海帛科生物技術有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50次鳥分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鳥分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書 | Mycobacterium aviumPCR | BK-P9420 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
人神經髓鞘蛋白1(p1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經髓鞘蛋白(p2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經絲蛋白(NF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經生長因子(NGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經生長導向因子Slit2 ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經降壓素(NT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經激肽B(NKB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經激肽A(NKA) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經保護因子(CVNPF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人神經氨酸酶(NA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
鳥分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書分泌和跨膜蛋白1抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:SECTM1
Schlafen家族14抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:SLFN14
5-羥色胺受體2B抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:5-HTR2B
調控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:SERTAD2
兔抗雞IgG 1mgRabbit Anti-chicken IgG
PE-Cy3標記的兔抗犬IgM抗體 0.1mlDog IgM/PE-Cy3
膠體金標記的羊抗兔IgG 0.5mlGoat Anti-rabbit IgG/Gold
PE標記的兔抗小鼠k鏈 0.1mlRabbit anti-mouse Kappa light chain/PE
Alexa Fluor 555標記的兔抗馬IgM 0.1mlRabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 555
APC標記的羊抗豚鼠IgG 0.1mlGoat Anti-Guinea pig IgG/APC
FITC標記的小鼠抗人IgG 0.3mlMouse Anti-human IgG/FITC
PE標記的小鼠抗兔IgM 0.1mlMouse Anti-Rabbit IgM/PE
生物素標記的兔抗親和素 0.1mlRabbit Anti-Avidin/Bio
APC標記的兔抗雞IgG 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG/APC
Cy5標記的兔抗羊IgM 0.1mlRabbit Anti-Goat IgM/Cy5