TTC，即2,3,5-氯化三苯基四氮唑，是一種脂溶性光敏感復合物。它是呼吸鏈中吡啶-核苷結構酶系統的質子受體，能與正常組織中的脫氫酶反應，生成紅色的甲臜(三苯基甲臢，TTF)，該物質不溶于水，因此可以用來表示細胞的活力。而缺血或壞死的組織內脫氫酶活性下降或喪失，不能與TTC反應，故不會產生顏色變化，保持蒼白。
基本原理
化學作用：
TTC(Triphenyltetrazolium chloride)是一種無色可溶性化合物，可被活細胞中的脫氫酶(如琥珀酸脫氫酶)還原，生成紅色不溶性的三苯甲臜(Formazan)。
反應式：
TTC(無色) + 脫氫酶(活性細胞) → Formazan(紅色沉淀)
關鍵條件：依賴細胞線粒體功能，僅存活且代謝活躍的組織能完成此反應。
染色結果判讀：
紅色區域：活細胞(脫氫酶活性正常)。
白色/蒼白色區域：壞死或凋亡細胞(脫氫酶失活，無法還原TTC)。
實驗步驟
樣本準備：
組織類型：心肌、腦、肝臟等(常用于缺血再灌注損傷模型)。
處理要求：新鮮樣本(避免固定)，迅速切片(厚度通常為1-2 mm)。
TTC溶液配制：
常用濃度：1-2% TTC溶于生理鹽水或PBS(pH 7.4)。
避光保存：TTC對光敏感，需現用現配或短期4℃避光儲存。
染色流程：
將組織切片浸沒于TTC溶液中，37℃避光孵育15-30分鐘(具體時間依組織類型調整)。
翻轉組織確保均勻接觸。
終止反應：PBS漂洗，4%多聚甲醛或10%福爾馬林固定(可選)。
觀察與記錄：
肉眼或顯微鏡下觀察，紅色為存活區，白色為壞死區。
定量分析：使用圖像分析軟件(如ImageJ)計算壞死區域占比。
