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T4 GP59 Loader protein

參  考  價:4368
具體成交價以合同協議為準
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    上海市

規格

100 ug 4368元 15盒可售

更新時間:2024-05-30 09:37:11瀏覽次數:177次

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貨號 XG-P3088 規格 100 ug
包裝 盒裝 用途 僅供科研研究實驗
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T4 GP59 Loader protein

T4 GP59 Loader protein

貨號

規格

分類

XG-P3088

100 ug

核酸修飾酶系列

描述:

T4 噬菌體復制分為依賴于起始子的起始復制和依賴于重組酶的復制。由起始復制產生的 3’-ssDNA 作為重組復制的步鏈侵入的組份,該 3’-ssDNA 被 T4 gp32蛋白所覆蓋,同時將 T4 UvsY 募集到此;T4 UvsY 作為T4 UvsX 的 loader 將其運載至此,于此同時 gp32 被置換下來, UvsX 和 UvsY 形成突觸結構, 然后侵入同源的雙鏈形成 D-Loop, 一旦形成 D-Loop, UvsX 即被置換下來。D-loop 被置換鏈作為滯后鏈合成的模板,很快被gp32 結合。隨后, 解旋酶 loader gp59 與 gp32 覆蓋的DNA 復制叉結合,將 gp41/61 運載至此, gp61 蛋白合成引物片段促進滯后鏈上 DNA 的合成,而 gp41 通過解旋模板而促進先導鏈的 DNA 合成。最后,聚合酶的滑板蛋白 gp45 和其 loder 蛋白 gp44/62 與先導鏈相結合,促進聚合酶 gp43 的組裝,gp45 將 gp43 運載至復制叉處后啟動先導鏈和滯后鏈的合成,gp44/62 隨后從復制叉處解離。因此, gp59 作為解旋酶 gp41 的 loader 在 gp41 引導的 DNA 先導鏈合成中起到重要作用。
儲存:-20℃。
Storage Buffer:
20mM Tris-HCl,pH7.5
200mM NaCl
5mM DTT
25% Glycerol


T4 GP59 Loader protein


T4 GP59 Loader protein

一、模板DNA:PCR反應需要模板DNA,如從細胞、組織、血液中提取DNA等;

二、引物:PCR反應的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;

三、dNTPs:PCR反應中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細胞分裂、DNA合成         等生物學過程,用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增;

四、Taq DNA聚合酶:PCR反應需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴增DNA鏈;

五、PCR buffer溶液:對PCR反應具有緩沖作用,調節反應pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛,可增強PCR反應特異性,從而提高反應效率;

六、酶切體系:PCR擴增往往涉及到重組、構建和測序等等實驗步驟,常常需要進行酶切操作。

七、MARK:一種分子量標準,用來判別DNA片段大小的工具。

八、DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應產物;


T4 GP59 Loader protein


T4 GP59 Loader protein

①Oligo dT
選擇Oligo dT時,要求RNA必須有Poly A,所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT,對RNA樣品的質量要求較高,不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進行RT反應,建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機引物和特異性引物的穩定性要好。
②隨機引物
適合各種RNA的RT,尤其適合模板豐度很低的情況(比如某個gene表達量很低)。選擇隨機引物時,第鏈cDNA合成反應中就是以所有的RNA為模板,然后進行PCR反應時設計引物進行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關系,一般建議每5µg總RNA的隨機引物的用量為50ng,如果每5µg總RNA的隨機引物的用量超過250ng,可能會導致小片段產物(<500bp)的增加和長片段、全長產物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物(GSP)是某個基因序列的一部分,與模板互補的引物。該引物需要結合目標RNA的已知序列進行設計。由于引物和RNA序列特異性結合,每個目標RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此,當分析多種目標時,則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同,所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物,建議對退火溫度進行優化。

T4 GP59 Loader protein

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